絞扼性神経障害に関与するT細胞サブセットの同定と神経ペプチド による治療法の開発

鉴定参与绞窄性神经病的 T 细胞亚群并开发基于神经肽的治疗方法

• 批准号: 21K09308
• 负责人: 高相 晶士
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09308/
• 关键词: T細胞; 絞扼性神経障害; RAG2 KO; マクロファージ; 末梢神経障害; T細胞サブセット; CD8; ペプチド

昨年度の研究成果からラット絞扼性末梢神経障害モデル（Chronic constriction injury ,CCI）の坐骨神経内にT細胞の動員が起こること、除圧することによりT細胞の減少と疼痛閾値の改善が起こることを明らかにしてきた。しかしながら、増加するT細胞の表現型とその役割は不明であった。本研究では、T細胞欠失マウスをもちいて絞扼性神経障害モデルにおけるT細胞の役割を検討した。T細胞欠損マウス（RAG2-KO）と野生型マウスの右坐骨神経を 9-0 nylon で 3 カ所結紮し CCI モデルを作成した。CCI作製 7, 14日後に坐骨神経を採取後、フローサイトメトリーを用いてCD3, CD4, CD8 陽性細胞の割合を検討した。また、リアルタイムPCRを用いてCCI作成3,5,7,14日後の坐骨神経におけるCD86,CD206,F4/80,IL-6,IL-17,TNF-αの発現を検討した。CCI後7.14日後において野生型マウスの坐骨神経におけるCD3＋CD8+細胞の割合が上昇した。一方、RAG-2 KOマウスではCD3+細胞は認められなかった。RAG-2 KOマウスにおけるマクロファージマーカー F4/80, M2 マクロファージマーカーCD206の発現は野生型マウスに比べ有意に高かった。CD8陽性T細胞はSchwann 細胞における TNF-α産生の増加や末梢神経障害に関与することが報告されている。T細胞の欠失により、M2マクロファージが増加したことから、CD8 T細胞はマクロファージの極性化に関与している可能性が示唆された。M2 マクロファージは抗炎症サイトカインや成長因子産生を介して末梢神経の修復過程に関与することが報告されいている。CD8陽性T細胞は絞扼性神経障害における治療ターゲットになる可能性が示唆された。

Last year's research results showed that the mobilization of T cells in sciatic nerve was initiated and reduced by Chronic restriction injury (CCI), and the pain threshold was improved. The phenotype of T cells is unknown. This study investigated the role of T cells in the pathogenesis of neurotoxicity. T cell deficiency (RAG2-KO) and wild-type (RAG 2-KO) After 7 and 14 days of CCI treatment, CD3, CD4, CD8 positive cells were isolated and analyzed. The expression of CD86, CD206,F4/80,IL-6,IL-17,TNF-α in sciatic nerve tissue after 3, 5, 7 and 14 days was investigated by PCR. After 7.14 days of CCI, the number of CD3 + CD8 + cells in the wild type increased. One side, RAG-2 KO CD3 + cells recognize RAG-2 KO CD8-positive T cells respond to increased TNF-α production by Schwann cells and are reported to be involved in peripheral neurotoxicity. T cell loss, M2 cell loss, CD8 cell loss, polarization, etc. M2 is involved in anti-inflammatory and growth factor production and in the repair process of peripheral nerves. CD8-positive T cells are resistant to neurotoxicity, and the possibility of treatment is discussed.

项目成果

末梢神経障害におけるV-set and transmembrane domain containing 4の役割の検討

V-set 和包含 4 的跨膜结构域在周围神经病变中的作用的检查

• 发表时间: 2021
• 作者: 横関雄司;内田健太郎;向井務晃;迎学;井上玄;宮城正行;高相晶士
• 通讯作者: 高相晶士

Nerve decompression surgery suppresses TNF-a; expression and T cell infiltration in a rat sciatic nerve chronic constriction injury model

神经减压手术抑制TNF-a；

• DOI: 10.1002/jor.25280
• 发表时间: 2022
• 期刊: J Orthop Res
• 影响因子: 2.8
• 作者: Mukai M;Uchida K;Inoue G;Satoh M;Miyagi M;Yokozeki Y;Hirosawa N;Matsuura Y;Ohtori S;Takaso M
• 通讯作者: Takaso M