腎細胞癌におけるBACH1機能解析を基礎とした抗PD-1抗体抵抗性獲得機序の解明

基于BACH1功能分析阐明肾细胞癌抗PD-1抗体耐药的获得机制

基本信息

批准号：
21K09426
负责人：
武本健士郎
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09426/
关键词：
腎細胞癌酸化ストレス上皮間葉系移行薬剤抵抗性

项目摘要

腎細胞癌(renal cell carcinoma, RCC)は酸化ストレスが発癌危険因子であり酸化ストレス応答に関与する転写因子の一つであるBTB domain and CNC homolog 1 (BACH1)に着目し研究を進めてきた。臨床検体を用いたBACH1の機能解析では、BACH1陽性群では有意にhigh stageであり、生存率も低いことが判明し、BACH1陽性群では血清炎症性マーカーであるCRPおよびリンパ球好中球比が有意に高値であった。この結果は臨床検体における炎症との相関を示唆するもであり、これまで他に報告がなく新たな知見となった。続いて、腎癌細胞株(786-O, Caki-1, ACHN)においてBACH1の分子機能解析(遊走能・浸潤能評価)を行った。腎癌細胞株においてBACH1は浸潤能および遊走能を制御していることが明らかになった。一方で増殖能においてはin vitroではBACH1発現と相関が認められなかった。さらに、下流の分子である抗酸化酵素HO-1を抑制性に制御していることも明らかとなり、BACH1は腎癌において抗酸化酵素HO-1を抑制することで炎症を惹起しその悪性度亢進に寄与している可能性が示唆された。生体内でのBACH1の腫瘍活性を解析する目的でマウスモデルを用いて評価した。まず、マウス腎癌細胞株であるRenCaのBACH1 CRISPR-KO株を樹立し皮下移植を行った。in vitroでの結果とは反してBACH1抑制にて増殖能の低下を認めた。またxenograft modelにおいては786-OのBACH1過剰発現株を皮下移植したところ、腫瘍の有意な増大を認めた。腫瘍活性のメカニズムを解明したところ、上皮間葉系移行関連遺伝子の活性化を認めた。

我们一直在进行研究，重点是BTB结构域和CNC同源1（Bach1），这是转录因子，其中氧化应激是癌症的危险因素，并且参与了氧化应激反应。使用临床标本对BACH1进行功能分析表明，Bach1阳性组显着较高，存活率也较低，而BACH1阳性组的血清炎症标志物CRP和淋巴细胞嗜中性粒细胞的比率明显更高。该结果表明与临床标本中的炎症有关联，并且是一个新发现，没有任何其他报告。随后，在肾癌细胞系（786-O，CAKI-1，ACHN）中进行了Bach1的分子功能分析（评估迁移和侵入能力）。发现Bach1调节肾脏癌细胞系中的侵入性和迁移潜力。另一方面，在增殖能力上没有观察到与Bach1表达的相关性。此外，已经揭示了它抑制下游分子的抗氧化剂HO-1，并表明Bach1可能会诱发炎症并通过抑制肾癌中的抗氧化剂HO-1来促进其恶性肿瘤。使用小鼠模型评估Bach1的肿瘤活性以分析体内肿瘤。首先，建立并皮下移植了小鼠肾脏癌细胞系Renca的Bach1 CRISPR-KO菌株。与体外结果相反，Bach1抑制作用显示出增殖能力的降低。此外，在异种移植模型中，皮下植入了786-O的BACH1过表达菌株，观察到肿瘤的显着增加。当阐明肿瘤活性的机制时，观察到与上皮间质转变相关的基因的激活。