多光子励起イメージング技術による新規低侵襲卵巣内がん微小残存病変の検出

利用多光子激发成像技术对卵巢微小残留癌病灶进行新型微创检测

• 批准号: 21K09469
• 负责人: 佐治 史惠
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09469/
• 关键词: 原子卵胞; 白血病細胞卵巣転移モデルマウス; 微小残存病変; 卵巣凍結; 原始卵胞; 多光子励起イメージング; 卵巣内微小がん微小残存病変

本研究では多光子励起イメージング技術により、卵巣の細胞とがん細胞を非侵襲的に区別化するための最適なイメージング条件を構築し、卵巣皮質内の微小残存病変(MRD)を検出することで、若年がん患者における唯一の妊孕性温存療法である卵巣凍結のMRD混入の危険性の低下と卵巣組織の移植後の血流障害軽減を目的とした原子卵胞部位得意的得意的新規卵巣組織凍結法の構築を目的とする。令和３年度はマウスの卵巣における原子卵胞、１次卵胞、二次卵胞および胞状卵胞等の各発育段階の卵胞を多光子励起顕微鏡による観察で区別化することに成功した。しかしながら、ヒト卵巣においては励起レーザー波長の組み合わせの検討や、卵巣皮質部の菲薄化を試みたが、原子卵胞を含むすべての卵胞の可視化には至らなかった。しかしながら卵巣がん卵巣においてコラーゲン組織の分解が見られ、正常卵巣と比較してコラーゲン組織観察所見に明らかな差が見られた。令和４年度は引き続きヒト卵巣における観察データの集積をおこなうとともに卵巣皮質内MRDの多光子励起顕微鏡による検出を目的として、令和３年度に作成した緑色蛍光タンパク質(GFP)を発現する遺伝子をトランスフェクションにより組み込ませたヒトB細胞白血病細胞由来細胞株を免疫不全マウスに接種した白血病細胞卵巣転移モデルマウスの作成を試みた。投与細胞数、飼育期間など効果的な転移モデルマウスの作成条件の構築を試みているが、現在、有効な観察結果を得るところまでは至っていない。

In this study, we established optimal conditions for multiphoton excitation and differentiation of noninvasive cells, and identified minimal residual disease (MRD) in the oocyte cortex. If the patient is pregnant, the only warm treatment is to reduce the risk of MRD mixing with egg freezing, reduce the blood flow damage after egg tissue transplantation, and construct a new egg freezing method. In the third year, the egg cells of each stage of development, such as atomic egg cells, primary egg cells, secondary egg cells and cellular egg cells, were successfully differentiated by multiphoton excitation microscopy. In addition to the above, we also try to visualize the egg cells by combining the excitation wavelength and the thinning of the egg cortex. The difference between normal and normal tissues is obvious. In the fourth year of the year, the MRD in the cortex was detected by multiphoton excitation microscopy. In 2003 and 2004, the green fluorescent protein (GFP) was produced, and the immune response of B cell leukemia cells was tested. The number of cells injected, the duration of breeding, the construction of conditions for the production of young fruits, the present situation, the results of observation, the results of experiments, and the results of experiments.