子宮内膜免疫寛容の転写制御機構を解明する

阐明子宫内膜免疫耐受的转录控制机制

基本信息

批准号：
21K09529
负责人：
村田紘未
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kansai Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

子宮内膜間質細胞が分泌するガレクチン9（LGALS9）は、子宮内膜の主要な免疫細胞である子宮ナチュラルキラー（NK）細胞に作用し分化を促すことによって、子宮内膜免疫寛容に重要な役割を果たしていることが報告されている。これまでにヒト子宮内膜におけるLGALS9の発現動態ならびに転写制御機構は未解明であったが、我々は令和3年度にヒト子宮内膜組織におけるLGALS9の発現動態を明らかにした。令和4年度はヒト子宮内膜間質細胞におけるLGALS9の転写制御機構の解明を進めた。培養子宮内膜間質細胞への脱落膜化処理（メドロキシプロゲステロン酢酸エステル（MPA）刺激）によってLGALS9発現は増加した。また、ヒト第17染色体上のLGALS9遺伝子とKSR1遺伝子の間の3773bpの遺伝子間領域は種を超えて保存されており、MPA刺激によって、この領域の転写活性の増大が認められた。HAND2/FOXO1抗体を用いたクロマチン免疫沈降－PCR法を行い、HAND2/FOXO1のLGALS9の遺伝子発現制御領域への結合を確認した。さらに、ルシフェラーゼレポーターアッセイを用いて、LGALS9の遺伝子発現制御領域の活性がHAND2によって増大する一方でFOXO1によっては減少することを証明した。本研究は関西医科大学倫理委員会によって承認され、正常月経周期のある女性から文書による同意を得た後、婦人科良性腫瘍に対する子宮全摘出術後に子宮内膜を採取し検体として用いた。

据报道，由子宫内膜基质细胞分泌的Galectin 9（LGALS9）通过作用于自然杀伤（NK）细胞（子宫内膜的主要免疫细胞）并促进分化而在子宫内膜免疫耐受性中起重要作用。 LGALS9在人子宫内膜和转录调控机制中的表达动力学尚未澄清，但是我们已经揭示了2021年人口子宫内膜组织中LGALS9的表达动力学。2022年，我们开始澄清人内层层层层表层中LGALS9的转录机制。通过在培养的子宫内膜基质细胞中，通过canter骨治疗（Medroxyprogesterone（MPA）刺激）来增加LGALS9的表达。此外，人类17染色体上的LGALS9和KSR1基因之间的3773 BP间基因区域是在物种之间保守的，MPA刺激显示该区域的转录活性增加。使用HAND2/FOXO1抗体进行染色质免疫沉淀-PCR，以确认Hand2/FoxO1与LGALS的基因表达调节区域的结合9。此外，我们证明了LGALS9的基因表达调节区域的活性通过手2增加了，但FOXO1降低。这项研究得到了Kansai医科大学伦理委员会的批准，并获得了月经周期正常的妇女的书面同意后，子宫内膜被收集并用作良性妇科肿瘤后的子宫切除术后用作标本。