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Subset cell analysis of gynecological cancer-associated fibroblast that induce lymph node metastasis.

诱导淋巴结转移的妇科癌症相关成纤维细胞的亚细胞分析。

基本信息

批准号：
21K09554
负责人：
村田卓也
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kawasaki Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

2021年4月から婦人科がんの手術検体10例において線維芽細胞様の初代培養細胞のクローンの樹立を試み、12クローンの樹立に成功した。その内訳は、卵巣がん大網転移1症例の組織から4クローン、子宮体がん5症例から計8クローンであった。また、漿液性卵巣がん1症例について線維芽細胞様クローンの樹立が現在進行中である。樹立した子宮体がんの線維芽細胞様細胞の6クローンのうち5クローンについて、Cytokeratin陰性、Vimentin陽性Cytokeratin、Vimentin、Smooth Muscle Actin (SMA) 陽性を確認し、がん関連線維芽細胞 (以下、CAFと略す) であることを確認した。うち1クローンについては、サイトケラチンが陽性となり、細胞の属性について精査する予定である。また、1クローンについては、microRNAのExsome解析を行なった。子宮体がんから樹立した子宮体がん細胞株HEC1B/GFPに対する共培養系を開発した。培養well内に挿入するチャンバーにコラーゲンゲル層を作製し、その表面上でがん細胞を培養することにより、HEC1B/GFPを良好な形態を維持した状態で培養が可能であることがわかった。well底でCAFを培養し、共培養を行って解析した結果、子宮体がんCAFの6株のいずれもが、がん細胞の増殖を促進した。CAFの転移誘発能の阻害戦略から見出した低分子化合部に関して、転移阻害剤として特許出願を行なった。

In April 2021, we tried to establish the first generation of cultured cells from 10 surgical specimens in the female department, and the establishment of 12 cells was successful. In addition, the number of cases of tissue, uterus and uterus in 1 case is 4, 8 and 9 respectively. 1 case of serous ovum and 1 case of serous ovum and 1 case of serous ovum. The 6 cells in the embryonic cells of uterus were identified, Cytokeratin negative, Vimentin positive Cytokeratin, Vimentin, Smooth Muscle Actin (SMA) positive, and CAF associated cells (hereinafter abbreviated). 1. The cell's properties are carefully examined.また、1クローンについては、microRNAのExsome解析を行なった。A co-culture line was developed for the establishment of uterine somatic cell lines HEC1B/GFP. Culture of HEC-1B/GFP in a good state is possible. CAF was cultured at the bottom of the well, and the results of co-culture were analyzed. The growth of CAF cells was promoted. CAF's migration resistance strategy has been developed for low molecular weight compounds, and migration resistance has been developed for special applications.