Identification and expansion of sensory epithelial stem cell from human inner ear organoid

人内耳类器官感觉上皮干细胞的鉴定和扩增

• 批准号: 21K09638
• 负责人: 中村 高志
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09638/
• 关键词: 内耳オルガノイド培養; 内耳オルガノイド; 感覚上皮幹細胞; 内耳再生

引き続き遺伝子改変されたES細胞株を用いた内耳オルガノイド培養を行って実験を行っている。BMP4、LDN27219やSB431542といった小分子化合物の投与量とタイミングを微調整することで、昨年までと比較して内耳への誘導効率の改善に成功した。本培養系は多能性幹細胞の集合体である胚様体に始まり、非神経外胚葉、プレプラコード、耳上鰓予定領域と段階を経て分化させるが、各段階ごとに特徴的な遺伝子発現を免疫染色とqPCRを用いて確認した。しかし当初予定してた内耳感覚上皮の幹細胞マーカーをラベルした細胞株では、他の細胞株と比較して誘導効率が不良であり単離培養できるほどのGFP陽性細胞が得られておらず、方針の変更が必要な状況である。

The ES cell line was cultured in vitro. BMP4, LDN27219 and SB431542 were used to adjust the dosage of small molecular compounds. This culture system consists of pluripotent stem cell aggregates, embryo initiation, non-neuroectoblast, embryo differentiation, ear branchial differentiation, embryo development with characteristics of each stage, immunostaining and qPCR. In the first place, the stem cells of the sensory epithelium of the inner ear were cultured in vitro and the induction rate of other cell lines was poor. In the second place, the GFP positive cells were cultured in vitro and the policy was changed.

项目成果

Generation and application of human inner ear organoid containing vestibular and cochlear like hair cells．

含有前庭和耳蜗样毛细胞的人内耳类器官的生成和应用。

• 发表时间: 2022
• 作者: Nishimura Goshi;Sano Daisuke;Arai Yasuhiro;Takahashi Hideaki;Hatano Takashi;Kitani Yosuke;Takada Kentaro;Wada Takashi;Hiiragi Yohei;Oridate Nobuhiko;Takashi Nakamura
• 通讯作者: Takashi Nakamura

聴覚・平衡覚機能再生に向けた幹細胞トランスレーショナルリサーチ ヒトオルガノイドモデルを用いた内耳研究の展望

用于听力和平衡功能再生的干细胞转化研究：使用人体类器官模型进行内耳研究的前景

• 发表时间: 2022
• 作者: Umatani M;Ogawa M;Hosokawa K;Kato C;Iwahashi T;Inohara H.;中村 高志
• 通讯作者: 中村 高志