緑内障術後創傷治癒におけるエピゲノム変化とメモリー効果に関する研究

青光眼后伤口愈合中表观基因组变化和记忆效应的研究

• 批准号: 21K09703
• 负责人: 井上 俊洋
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09703/
• 关键词: 緑内障; 創傷治癒; エピゲノム; 線維化; ファイブロサイト

マイトマイシンCを併用しないウサギ濾過手術モデルと併用したin vivoモデルで遺伝子発現を網羅的に比較する目的でRNAシークエンスを行った。術後3時間のデータでは、17014遺伝子のうち、発現変化に有意差のあった遺伝子は2834個であった。このうちエピゲノム因子では、KDM4C、HDAC5、HDAC6、HDAC8、HDAC11、SMYD3、SIRT5、DNMT1、DNMT3Aの発現低下をみとめた。一方、培養結膜線維芽細胞にマイトマイシンC処理の有無で同様に比較したin vitroモデルでは、3時間後のデータでKDM4B、KDM4C、KMT2C、HDAC3の有意な低下をみとめた。以上から、共通する因子としてKDM4Cを同定し、その基質の一つであるトリメチル化H3K9をターゲットとして解析を進めた。下流因子の候補を検索するために、結膜線維芽細胞を用いたin vitroモデルで、マイトマイシンC処理3日後のRNAシークエンスを行った。この結果に対してKEGGパスウェイ解析を行ったところ、DNA replicationとCell CycleがTop2であった。3日後に変動していたCell Cycleの遺伝子のうち、c-Myc、CCNA1、CCNA2のプロモーター領域にプライマーを設定し、抗メチル化H3K9抗体を用いてChIP-qPCRを行ったところ、マイトマイシンC処理後にシグナルが上昇する傾向を認めた。以上の結果から、マイトマイシンC処理によって、結膜線維芽細胞において細胞周期を正に制御する遺伝子のプロモーター領域においてH3K9のメチル化が亢進し、結果としてその遺伝子発現が低下していることが示唆された。

The combination of RNA and RNA in vivo 3 days after surgery, 17014 children were born, and 2834 children were born. KDM4C, HDAC5, HDAC6, HDAC8, HDAC11, SMYD3, SIRT5, DNMT1, DNMT3A are all low in the occurrence of these factors. In one case, cultured conjunctival cells were treated with vitro C and KDM4B, KDM4C, KMT2C and HDAC3 respectively. The above factors are common to KDM4C, and the matrix of H3K9 is analyzed. Downstream factor candidates were used in vitro, and RNA was used in 3 days after treatment. The results of this study include KEGG, DNA replication and Cell Cycle analysis. After 3 days, the Cell Cycle gene expression, c-Myc, CCNA1, CCNA2, and the anti-H3K9 antibody were set up. After treatment, the cell cycle gene expression tended to increase. As a result, the cell cycle of conjunctival cells was controlled positively, and the cell cycle of H3K9 was increased. As a result, the cell cycle of conjunctival cells was decreased.

项目成果

新しい濾過手術用デバイスの可能性.

新过滤手术设备的可能性。

• 发表时间: 2022
• 作者: 藤本智和;井上みゆき;井上俊洋;Takashi Baba;井上俊洋
• 通讯作者: 井上俊洋

Elevated soluble vascular endothelial growth factor receptor levels in aqueous humor from patients with different types of glaucoma.

不同类型青光眼患者房水中可溶性血管内皮生长因子受体水平升高。

• DOI: 10.1016/j.exer.2022.109204
• 发表时间: 2022
• 期刊: Experimental Eye Research
• 影响因子: 3.4
• 作者: Kenichi Nakamura;Sachi Kojima;Miyuki Inoue-Mochita;Hidenobu Tanihara;Toshihiro Inoue
• 通讯作者: Toshihiro Inoue

シュレム管内皮細胞におけるTGF-β2誘発EndMT様変化に対するROCK阻害剤の影響

ROCK抑制剂对TGF-β2诱导的施累姆氏管内皮细胞EndMT样变化的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: 藤本智和;井上みゆき;井上俊洋
• 通讯作者: 井上俊洋

The effects of materials of glaucoma drainage devices on rabbit's ocular tissue.

青光眼引流装置材料对家兔眼组织的影响。

• 发表时间: 2021
• 作者: Nakamura K;Fujimoto T;Maki K;Shimazaki A;Kato M;Tanihara H;Inoue T.
• 通讯作者: Inoue T.

TGF-β-induced activation of conjunctival fibroblasts is modulated by FGF-2 and substratum stiffness.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0242626
• 发表时间: 2020
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Matsumura T;Fujimoto T;Futakuchi A;Takihara Y;Watanabe-Kitamura F;Takahashi E;Inoue-Mochita M;Tanihara H;Inoue T
• 通讯作者: Inoue T