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加齢黄斑変性における「網膜色素上皮-ブルッフ膜」メンテナンスの解明

阐明年龄相关性黄斑变性中“视网膜色素上皮-布鲁赫膜”的维持

基本信息

批准号：
21K09705
负责人：
加藤亜紀
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

In　vitroにおいては2021年度に引き続いて、ドイツアイバンクからの細胞提供、企業からのprimary　RPEの購入ができなかったため、ヒトテロメア逆転写酵素（hTERT; Human Telomerase Reverse Transcriptase）遺伝子を初代培養細胞に導入して作製したRPE使用して、スフェロイド作成、研究を継続した。免疫染色においてはコラーゲンやエラスチンなどに続き、apoリポタンパクの染色が可能であったが、アミロイド前駆タンパクやアミロイドの染色は困難であった。現在条件を変えて継続中である。またタイムラプス撮影において、詳細に撮影する時間を変更させて、リポタンパク排出やドルーゼン形成の瞬間をとらえられないか観察した。現在撮影に至っておらず、継続中である。併せて、スフェロイドにストレスを与えた時の変化を観察するために、24～48時間程度で安定したスフェロイドとなるよう、条件を再検討した。In vivoにおいては、長寿医学研究所/神経病理研究所に保存されている高齢者の眼球固定標本の免疫染色を行った。固定標本については、アミロイド前駆タンパクは染色可能であったがTauタンパク、アミロイドβの染色はできなかった。賦活化の条件を変更するなどして継続中である。凍結標本については、アミロイド前駆タンパクのみでなくアミロイドβ、Tauタンパクも染色可能であった。しかし、多くの標本の保存状態が悪く、定量は困難であった。固定標本において、ドルーゼンを含む切片の有無を確認したが、見つけることは困難であった。

In vitro, in 2021, the introduction, production and research of human telomerase reverse transcriptase (hTERT; Human Telomerase Reverse Transcriptase) gene into primary cultured cells were carried out. Immunostaining is possible and difficult. Now the conditions are changed. For example, if you want to change the time of collection, change the time of collection. Now the shadow to. The time limit is 24~48 hours. In vivo, the Institute of Longevity Medicine/Institute of Neuropathology preserved the eyeballs of patients with high fever and immunostaining. Fixed Li The conditions for activation are changed. Freezing the plum is not easy, but it is easy to dye it. The state of preservation of the plum tree is difficult to quantify. Fixed Li