ノックアウトマウスとレポーターマウス作製によるType I Runx2の機能解明
通过生成基因敲除小鼠和报告小鼠来阐明 I 型 Runx2 的功能
基本信息
- 批准号:21K09819
- 负责人:
- 金额:$ 2.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Runx2は、間葉系幹細胞から前骨芽細胞への分化を誘導、さらに未熟骨芽細胞へと分化を誘導し、骨基質タンパク産生にも関与する。また、軟骨細胞の後期分化にも必須の転写因子であり、骨形成において主要な役割を担っている。Runx2は、2つのプロモーター(P1, P2)によって転写が制御されており、P1プロモーターから転写されるType II Runx2ノックアウトマウスは、Runx2ノックアウトマウスと比較し、骨形成異常は比較的軽微である。このため、P2プロモーターから転写されるType I Runx2が骨形成に重要な働きをすることが推測される。Type I Runx2の機能を明らかにし骨形成機構の理解を深めるために、昨年度P2プロモーターを欠失および変異させ野生型Type II Runx2のみを発現できるType I Runx2欠失マウスの作製に成功した。当該年度は、このType I Runx2欠失マウスから胎生15.5日と18.5日のマウスの骨格標本を作製し、骨・軟骨形成について検討した。この結果、明らかな骨・軟骨形成遅延は認められなかった。このため、Runx2ヘテロマウスとの交配により、Type I Runx2 / Runx2ヘテロマウスを作出し、その骨格標本での骨・軟骨形成を検討している。また、これまでのP2プロモーターのトランスクリプトーム解析Cap Analysis of Gene Expression (CAGE)の結果から、P2プロモーターの転写開始点は複数あることが予想されたため、このType I Runx2欠失マウスについてもCAGEを行い、転写開始点の同定が必須と考えられた。このため、胎生15.5日の四肢および18.5日の頭蓋冠からRNAサンプルの収集を行った。
Runx2 は, mesenchymal stem cells か ら anterior bone bud cells へ の を induction differentiation, さ ら に unripe bone bud cells へ を induced し と differentiation and bone matrix タ ン パ ク produce に も masato and す る. Late の ま た, cartilage cell differentiation に も must の planning write factor で あ り, bone formation に お い cut を bear っ て main な service て い る. Runx2 は, 2 つ の プ ロ モ ー タ ー (P1, P2) に よ っ て planning write が suppression さ れ て お り, P1 プ ロ モ ー タ ー か ら planning write さ れ る Type II Runx2 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス は, Runx2 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス と comparison し, comparison of abnormal bone formation は 軽 micro で あ る. こ の た め, P2 プ ロ モ ー タ ー か ら planning write さ れ る Type I Runx2 が bone formation に important な 働 き を す る こ と が speculation さ れ る. Function of the Type I Runx2 の を Ming ら か に し bone formation institutions の understand を deep め る た め に, yesterday's annual P2 プ ロ モ ー タ ー を owe lost お よ び - different さ せ wild Type Type II Runx2 の み を 発 now で き る Type I Runx2 owe lost マ ウ ス の cropping に successful し た. When the annual は, こ の Type I Runx2 owe lost マ ウ ス か ら viviparous 15.5 day と 18.5 の マ ウ ス の し the bone specimens を cropping, bone, cartilage formation に つ い て beg し 検 た. The <s:1> <s:1> result shows that ら な な osteochondral formation 遅 is delayed and is recognized. こ の た め, Runx2 ヘ テ ロ マ ウ ス と の mating に よ り, Type I Runx2 / Runx2 ヘ テ ロ マ ウ ス を し, そ の bone specimen で の bone, cartilage formation を beg し 検 て い る. ま た, こ れ ま で の P2 プ ロ モ ー タ ー の ト ラ ン ス ク リ プ ト ー ム parsing Cap Analysis of Gene Expression (CAGE) の results か ら, P2 プ ロ モ ー タ ー の planning write start は plural あ る こ と が to think さ れ た た め, こ の Type I In Runx2, if there is a deficiency in ウスに ウスに て て て CAGEを, the starting point of <s:1> and 転 must be written in と test えられた. <s:1> ため, fetal birth 15.5-day <s:1> limb および 18.5-day <e:1> skull and crown ら らRNAサ <s:1> プ プ サ プ <s:1> <s:1> collection を row った.
项目成果
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会议论文数量(0)
专利数量(0)
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生体内でRunx2の骨芽細胞・軟骨細胞における機能に必須なエンハンサー領域の同定
体内成骨细胞和软骨细胞中 Runx2 功能必需的增强子区域的鉴定
- 批准号:
24K12356 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 2.66万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)