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Development of novel cancer therapy targeting the interaction of the HSP40 family with mutant p53

针对 HSP40 家族与突变 p53 相互作用的新型癌症疗法的开发

基本信息

批准号：
21K09855
负责人：
戒田篤志
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09855/
关键词：
頭頸部がん p53 HSP40ファミリー p53変異 Gain of function HSP40 ケミカルスクリーニング

项目摘要

p53の安定化に寄与し得るHSP40ファミリーメンバーを同定すべく、2021年度より変異p53の蛍光標識ベクターの作製を試みてきた。p53R175H変異に対して蛍光タンパク質であるAcGFPをN末端側またはC末端側に融合したベクターをそれぞれ作製し、その機能性について検討したところ、C末端側に融合した際に内因性変異p53に類似した挙動を示すことが明らかになったため、p53R175H-AcGFPベクターを使用してHSP40ファミリーメンバー同定のためのスクリーニングを行った。具体的には各HSP40に対するsiRNAをデザインし、上記ベクターを頭頸部扁平上皮癌細胞株であるHN31細胞のp53ノックアウト株に導入した細胞に対して各siRNAを作用させた際にGFP発現がどのように変化するかを自動顕微鏡観察システム下にて検討を行った。その結果、一部のHSP40ファミリーメンバーにおいて20％前後の発現低下が認められたものの、その変化はわずかであった。上記ベクターでは、p53安定化に対してcriticalな作用を示し得るHSP40を同定できなかったため、変異p53(C176F)を発現しているHN31細胞を用い、各siRNAを作用させ、p53に対する蛍光免疫染色後にその蛍光発現から内因性の変異p53発現の変化について解析した。その結果、少なくとも6種類のHSP40に対するsiRNAで処理した際ににおいて30～60％程度の発現低下が認められた。現在、p53安定化因子候補として同定されたHSP40についてvalidationを行っているところである。

The stability of p53 is determined by HSP40. In 2021, the stability of p53 is determined by HSP 40. p53R175 H-AcGFP N-terminal side fusion, control, functional, C-terminal side fusion, intrinsic p53 similar to HSP40 H-AcGFP N-terminal side fusion, control, functional, C-terminal side fusion, intrinsic p53 similar to HSP40 H-AcGFP N-terminal side fusion, intrinsic p53 similar to HSP40 H-AcGFP N-terminal side fusion. Specifically, siRNA targeting HSP40 was introduced into HN31 cells, and GFP expression was detected under automatic microscopy. The result is that the HSP40 of the first part is low before and after 20% Note that HSP40 was identified and p53(C176F) was detected in HN31 cells, siRNA was detected and p53 was analyzed after photoimmunostaining. As a result, the expression of HSP40 in 6 species was reduced by 30~60% during siRNA treatment. Now, the p53 stabilization factor candidate is the same as HSP40.

项目成果

期刊论文数量（7）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

DNAJA1 promotes cancer metastasis through interaction with mutant p53.

DOI：
10.1038/s41388-021-01921-3
发表时间：
2021-08
期刊：
Oncogene
影响因子：
8
作者：
Kaida A;Yamamoto S;Parrales A;Young ED;Ranjan A;Alalem MA;Morita KI;Oikawa Y;Harada H;Ikeda T;Thomas SM;Diaz FJ;Iwakuma T
通讯作者：
Iwakuma T

Children's Mercy Research Institute(米国)

儿童慈善研究所（美国）