Crouzon症候群FGFR2変異型の硬組織形成異常解明による治療薬探索

通过阐明克鲁松综合征 FGFR2 变异的硬组织发育不良来寻找治疗药物

• 批准号: 21K09943
• 负责人: 鳥居 大祐
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09943/
• 关键词: Crouzon症候群; 頭蓋縫合早期癒合症候群; FGFR2; ゲノム編集; 一塩基置換

令和4年度は、CRISPR/Cas9を用いた一塩基置換法によって、Crouzon症候群のFGFR2変異のバリアントで最も報告の多いCys342Tyrについてモデル細胞を作製するため、歯髄幹細胞にヒトテロメラーゼ逆転写酵素（hTERT）遺伝子を導入し不死化細胞作製を行った。不死化後の細胞については、単クローン化を行い、hTERT遺伝子発現を確認したほか、もとの歯髄幹細胞と比較した多分化能の解析を現在行っている。また、今回作製予定のFGFR2Cys342Tyr変異細胞との性質の比較のため、別の箇所のFGFR2変異を有するCrouzon症候群患者由来歯髄幹細胞についてもhTERT遺伝子導入を行った。今回作製した不死化細胞を用いて、FGFR2Cys342Tyr変異Crouzon症候群モデル細胞作製を行うことで、その後の単クローン化やシーケンス解析等が可能になり、Crouzon症候群の分子生物学的解析をより進めることができると考えている。

In 2010 and 2014, CRISPR/Cas9 was introduced into the FGFR2 variant of Crouzon syndrome using a single-base substitution method. The most frequently reported variant of Cys342 Tyr was introduced into non-apoptotic cells using stem cell reverse transcription enzyme (hTERT). After the death of the cell, the process of differentiation, hTERT gene discovery, identification, comparison and differentiation of stem cells can be performed. Comparison of the properties of FGFR2Cys342 Tyr variant cells and the presence of FGFR2 variants in different sites in patients with Crouzon syndrome. This paper discusses the possible application of FGFR2Cys342Tyr variant Crouzon syndrome in the molecular biology analysis of Crouzon syndrome.