Investigation of inhibitory mechanisms of ameloblastoma proliferation by benzbromarone.

本研究の目的は、エナメル上皮腫に対するbenzbromaroneによる細胞死の作用機序をin vitro（遺伝子レベル、細胞レベルおよび組織レベル）およびin vivo（ヌードマウスへのオルガノイド移植による生体内での効果）で解明することである。初年度となる令和3年度は研究遂行により以下の成果を得た。1. エナメル上皮腫細胞を用いたbenzbromaroneによる細胞死についての基礎医学的検討：エナメル上皮腫細胞（AM-1）でのbenzbromarone受容は、尿酸トランスポーターの一種であるSLC2A9を介したものと考えていたが、その後の研究により、細胞増殖に関与すると考えられているEYA（eyes absent family遺伝子）によるものである可能性が高いと考えられた。一方、AM-1を基に作製したオルガノイド（スフェロイド）に対してbenzbromarone投与により、caspase3の活性化を伴うアポトーシスが引き起こされることが明らかとなった。2. 病理切片を用いたbenzbromaroneが作用する受容体の病理組織学的検討：エナメル上皮腫の病理切片からRNAを抽出し、それを用いて発現解析を行った結果、EYA-1が高発現していることが明らかとなった。3. ヌードマウスへのオルガノイド移植によるin vivo研究：本実験に関しては、これまでできる限りエナメル上皮腫の生育環境と類似させるためにヌードラット顎骨への移植を試みたが移植片（オルガノイド）が生着しなかったため、過去に報告のあるヌードマウスを頭頂部皮下に移植する方法に切り替え、in vivo実験を行っていくこととした。4. エネメル上皮種のマーカー検索として、新たに唾液中のEYA関連のmiRNAについての調査を行うこととした。現在、エナメル上皮種患者8名、健常者20名から唾液提供を受け、解析中である。

本研究の目的は、エナメル上皮腫に対するbenzbromaroneによる細胞死の作用機序をin vitro（遺伝子レベル、細胞レベルおよび組織レベル）およびin vivo（ヌードマウスへのオルガノイド移植による生体内での効果）で解明することである。初年度となる令和3年度は研究遂行により以下の成果を得た。1. エナメル上皮腫細胞を用いたbenzbromaroneによる細胞死についての基礎医学的検討：エナメル上皮腫細胞（AM-1）でのbenzbromarone受容は、尿酸トランスポーターの一種であるSLC2A9を介したものと考えていたが、その後の研究により、細胞増殖に関与すると考えられているEYA（eyes absent family遺伝子）によるものである可能性が高いと考えられた。一方、AM-1を基に作製したオルガノイド（スフェロイド）に対してbenzbromarone投与により、caspase3の活性化を伴うアポトーシスが引き起こされることが明らかとなった。2. 病理切片を用いたbenzbromaroneが作用する受容体の病理組織学的検討：エナメル上皮腫の病理切片からRNAを抽出し、それを用いて発現解析を行った結果、EYA-1が高発現していることが明らかとなった。3. ヌードマウスへのオルガノイド移植によるin vivo研究：本実験に関しては、これまでできる限りエナメル上皮腫の生育環境と類似させるためにヌードラット顎骨への移植を試みたが移植片（オルガノイド）が生着しなかったため、過去に報告のあるヌードマウスを頭頂部皮下に移植する方法に切り替え、in vivo実験を行っていくこととした。4. エネメル上皮種のマーカー検索として、新たに唾液中のEYA関連のmiRNAについての調査を行うこととした。現在、エナメル上皮種患者8名、健常者20名から唾液提供を受け、解析中である。