口腔マイコプラズマのヒト口腔粘膜上皮ゲノム変異因子としての可能性

口腔支原体作为人类口腔粘膜上皮基因组突变因子的可能性

• 批准号: 21K10145
• 负责人: 齋藤 勇起
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10145/
• 关键词: M. salivarium; 選択培地; 特異的PCR法; マイコプラズマ; ゲノム変異因子

口腔粘膜上皮は常に口腔細菌の暴露を受けており，口腔粘膜角化性病変の発症機序に口腔細菌の関与が推察されるが，十分なエビデンスは構築されていない．本研究ではMycoplasma salivarium が口腔白板症で明らかにされているゲノム変異を誘導するか否かを明らかにする．申請者らはこれまでにM. salivarium が口腔白板症病理組織から分離されることを見出した．さらに，切断・変異を惹起するゲノム配列の認識に関わるCRISPR 特有のスペーサー配列がM. salivarium の株により異なることを見出している（表）．このことから口腔白板症にはある特定のCRISPR 配列を有するM. salivarium が強く関連すると推察した．初年度においては，コロナウイルスの影響もあり臨床検体の採取が困難であったため，臨床検体よりM. salivarium を分離する実験系の確立を目指した．その結果，マイコプラズマ選択培地の作製とM. salivarium 特異的PCR法を開発し，従来の手法と比較して簡便かつ短時間に分離できることを明らかにした．

口服粘膜上皮不断暴露于口服细菌，可以推断口腔细菌参与口服粘膜发育机制，但尚未建立足够的证据。这项研究将阐明支原体唾液是否诱导口腔白细胞中揭示的基因组突变。申请人以前已经发现，唾液菌是从口腔白细胞病理组织中分离出来的。此外，已经发现，CRISPR独有的间隔序列与识别引起裂解和突变的基因组序列有关，这取决于唾液支原体的菌株（表）。这表明具有特定CRISPR序列的唾液菌与口服白细胞密切相关。在第一年，由于冠状病毒的作用，很难收集临床标本，因此我们旨在建立一个将唾液支原体与临床标本分开的实验系统。结果，我们开发了一种支原体选择性培养基，并开发了一种唾液特异性PCR方法，该方法表明，比常规方法可以在简单且短的时间内将其分开。