軟骨石灰化不全ラットの病態責任遺伝子と変動シグナルの解明と治療法の模索

阐明导致软骨钙质缺乏症大鼠病理状况和波动信号的基因并寻找治疗方法

• 批准号: 21K10174
• 负责人: 永山 元彦
• 金额: $ 1.58万
• 依托单位: Asahi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10174/
• 关键词: 軟骨内骨化; Wntシグナル; ヘッジホッグシグナル

常染色体劣(潜)性遺伝形式でくる病/骨軟化症に類似した軟骨の形態的異常を示す自然発症型の軟骨石 灰化不全(cartilage calcification insufficient, CCI)を示すCCIラットの変異遺伝子および ヒトにおける発育異常の対応を課題として、CCIラットの頭蓋底や下顎頭における軟骨内骨化と成長の遅延で、イン ディアンヘッジホッグ (IHH)シグナルの転写因子Gli1mRNAの過剰発現と 軟骨細胞の増殖や分化が抑制される可能性を報告してきた。 これまでの検索結果から、CCI ラットの発症原因や機序について、Ihh 等のレセプタ ー的働きの要素が考えられた。軟骨基質形成のアグリカン合成過程異常 の結果 (Tanaka M. Exp Anim Tokyo, 2015, Shibata S. Anat Sci Int., 2020)から、ヒト骨軟骨系疾患にみられる発育異常に対応していることが考えられる。 また、バイオインフォマティクスによる分子間相互作用ネットワーク(代謝、シグナル伝達、 遺伝情報等)の二項関係に基づいた情報から、MEPE, DMP1, MMP8, FCNB, PHEX等で発現低下とWnt, MAPKのpathwayで低下を示した。そこで、これら分子のタンパク発現と遺伝子発現について分子生物学的に検索するため、 採取したCCIラットとWTラットの膝関節軟骨、頭蓋底軟骨結合部、お よび顎関節頭軟骨のパラフィン組織標本を作製し、cDNAの抽出を行った。現在、組織標本から抽出したcDNAから次世代シークエンスによる解析へと進めている。しかしながら、遺伝子保存状態を含む精度を調査したところ、固定後の標本からDNAやRNAの断片化が明らかになっていることが判明し、室温保存から冷蔵保存に移行した。

Autosomal inferior (latent) genetic disease/osteomalacia, a morphological abnormality similar to that of cartilage, a natural cartilage type of cartilage stone, insufficient cartilage calcification, CCI)すCCIラットの変伝子およびとして、CCIラットのCranial baseやMandibular head におけるEndochondral ossification and growth の遅 extensionで、インディアンヘッジホッグ (IHH) Report on the possibility of inhibiting the proliferation and differentiation of chondrocytes through the detection of factor Gli1mRNA. これまでの検取 results から, CCI ラットの発 Causes や机 sequence について, Ihh ect のレセプタ ー's ききのelements が考えられた. The result of abnormal synthesis process of cartilage matrix formation (Tanaka M. Exp Anim Tokyo, 2015, Shibata S. Anat Sci Int., 2020) から, ヒトOsteochondral diseases, にみられる発Abnormality, に対応していることが考えられる. また, バイオインフォマティクスによる intermolecular interaction ネットワーク (metabolism, シグナル伝达, The binomial relationship of legacy information, etc., the information of MEPE, DMP1, MMP8, FCNB, PHEX, etc. is low and Wnt, and the path of MAPK is low and low. Molecular biology of molecular biology We collected tissue specimens from CCI WT knee joint cartilage and cranial cartilage junction, and jaw joint head cartilage tissue specimens, and extracted cDNA. Nowadays, tissue specimens are extracted, cDNA is extracted, and next-generation DNA analysis is carried out.しかしながら, the preservation status of the remains を contains the precision を investigation したところ, the specimen after fixation からDNA やThe fragmentation of RNA can be clearly understood, and it can be stored at room temperature and stored in cold storage.