A mechanism underlying the inhibition of steatohepatitis via FoxO3

FoxO3 抑制脂肪性肝炎的机制

基本信息

批准号：
21K11595
负责人：
小松利光
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K11595/
关键词：
Foxo3 非アルコール性脂肪肝炎肝がん NASH 肝臓マクロファージ

项目摘要

肝細胞特異的Foxo3欠失マウス（LKO）は、脂肪肝にはなるが非アルコール性脂肪肝炎（NASH）に進行しない。Foxo3転写因子は、肝臓の脂肪合成や老化の基盤となる細胞レベルの軽微な炎症を制御すると考えられることから、炎症を惹起されやすいマクロファージ特異的Foxo3欠失マウス（Lysm-Foxo3KO）とLKOマウスを交配したダブルコンディショナル欠失マウス（dcKO）で通常飼料（RD）によるNASH誘導を試みた。しかしながら52週齢時点で、dcKOマウスの体重、摂食量に有意な増加は見られなかった。線維化誘導負荷をかけるため55週齢から一部マウスに高脂肪食（HFD）を与えて6ヶ月間飼育したところ、dcKO-HFD群で有意に体重が減少し、肉眼的に50％（2/4匹）で肝がんが認められた。低体重マウスと肝がん個体は一致していることから、がんによる体重減少と考えられる。コントロール（Cnt）-HFD群では肝がんは観察されなかった。また、通常食群ではCnt、dcKOマウスともに異常は認められなかった。上述のモデルとは別に、Cnt、LKOマウスにGAN飼料（高脂肪・高コレステロール・フルクトース）を与えて人工的にNASH化誘導する実験群を作製し、Foxo3欠失による影響を検証した。GAN開始後32週（44週齢）、38週経過時点（50週齢）のdcKOマウスの体重・摂食量は、Cntマウスと有意差はなかった。肉眼的に肝臓がんと見られる所見は各群１検体ずつ観察された。線維化進行度を検証するため、50週齢モデル（n=4）でシリウスレッド染色を行い、オールインワン蛍光顕微鏡（BZ-X700、キーエンス）で対物20倍・約400視野での染色面積を測定した。その結果、LKO-GANマウスで線維化が多い傾向が見られたが、統計的有意差はなかった。

肝细胞特异性FOXO3缺陷小鼠（LKO）会引起脂肪肝，但不会发展为非酒精性脂肪变性（NASH）。 Since Foxo3 transcription factors are thought to regulate minor cellular inflammation, which is the basis of liver fat synthesis and aging, we attempted to induce NASH by normal diet (RD) in double-conditional deletion mice (dcKO) that were mated with macrophage-specific Foxo3-deficient mice (Lysm-Foxo3KO) and LKO mice, which are prone to inflammation.但是，在52周龄时，没有观察到体重或进食量的DCKO小鼠的大量增加。当一些小鼠从55周龄喂养纤维化诱导负荷的高脂饮食（HFD）时，在高脂饮食（HFD）中喂食一些小鼠6个月，并且在DCKO-HFD组中体重显着降低，并且在50％（2/4动物）中观察到肝癌。低体重小鼠和患有肝癌的个体是一致的，人们认为体重减轻是由癌症引起的。在对照组（CNT）-HFD组中未观察到肝癌。此外，在正常饮食组中，在CNT或DCKO小鼠中未观察到异常。除上述模型外，我们还准备了一个实验组，其中将CNT和LKO小鼠提供了GAN饮食（高脂肪，高胆固醇，果糖），以人为地诱导NASH，并测试了FOXO3删除的效果。 DCKO小鼠在32周（44周龄）和GAN后38周（50周龄）的DCKO小鼠的体重和进食量没有显着差异。观察到一个严重的肝癌的一个样本。为了验证纤维化的进展，在50周龄的模型（n = 4）上进行了Sirius红色染色，并在大约400个视野上使用一个多一部分荧光显微镜（BZ-X700，钥匙）测量染色区域。结果表明，LKO-GAN小鼠具有更多纤维化的趋势，但没有统计学上的显着差异。