リコンビナントトロンボモジュリンの血管内皮グリコカリックス増生効果の検討

2022年度は2019年度から継続して、血管炎モデルマウスに対するリコンビナントトロンボモジュリンFull length (rTM) のグリコカリックス（eGC）増生効果に着目し、肺以外の臓器の増生効果と関連遺伝子について研究を行った。まず10週令のC57BL6マウスにLipopolysaccharaide (LPS) 20㎎/kg腹腔内投与し、血管炎モデルマウスを作成。生理食塩水、rTMをそれぞれ腹腔内投与し、心臓からRNAを抽出、Agilent Expression Arrayを使用してマイクロアレイ分析を行った。結果、硫黄化合物の異化プロセスに関連する遺伝子セットであるGene set enrichment analysis（GSEA）の遺伝子オントロジーおよび京都遺伝子ゲノム百科事典 (KEGG) 分析、クエン酸回路 TCA 回路、ピルビン酸代謝、および心臓伝導による心拍数の調節能が、生理食塩水投与したマウスよりも rhTM治療マウスで有意にアップレギュレートされた。これにより、有酸素代謝が心臓で強化され、心拍数と心臓伝導を調節する遺伝子セットに影響を与えることを明らかにした。硫黄化合物異化過程遺伝子セットでは、rhTM投与によりeGCのコア蛋白の一つであるグリピカン-1が促進された。免疫組織化学染色でもLPS投与により逸脱したグリピカン-1がrTMの投与により修復された。つまり、rTMは心臓の血管内皮保護だけでなく、eGC増生にも密接に関連していることが分かった。そして、この結果は2019年に報告した肺でのrTMの治療効果解析と異なる遺伝子が促進されており、これは同型の連続型毛細血管をもつ臓器でもeGCの構成成分が異なり、同薬剤でも臓器によって促進される遺伝子が異なる可能性が示唆された。

2022年度は2019年度から継続して、血管炎モデルマウスに対するリコンビナントトロンボモジュリンFull length (rTM) のグリコカリックス（eGC）増生効果に着目し、肺以外の臓器の増生効果と関連遺伝子について研究を行った。まず10週令のC57BL6マウスにLipopolysaccharaide (LPS) 20㎎/kg腹腔内投与し、血管炎モデルマウスを作成。生理食塩水、rTMをそれぞれ腹腔内投与し、心臓からRNAを抽出、Agilent Expression Arrayを使用してマイクロアレイ分析を行った。結果、硫黄化合物の異化プロセスに関連する遺伝子セットであるGene set enrichment analysis（GSEA）の遺伝子オントロジーおよび京都遺伝子ゲノム百科事典 (KEGG) 分析、クエン酸回路 TCA 回路、ピルビン酸代謝、および心臓伝導による心拍数の調節能が、生理食塩水投与したマウスよりも rhTM治療マウスで有意にアップレギュレートされた。これにより、有酸素代謝が心臓で強化され、心拍数と心臓伝導を調節する遺伝子セットに影響を与えることを明らかにした。硫黄化合物異化過程遺伝子セットでは、rhTM投与によりeGCのコア蛋白の一つであるグリピカン-1が促進された。免疫組織化学染色でもLPS投与により逸脱したグリピカン-1がrTMの投与により修復された。つまり、rTMは心臓の血管内皮保護だけでなく、eGC増生にも密接に関連していることが分かった。そして、この結果は2019年に報告した肺でのrTMの治療効果解析と異なる遺伝子が促進されており、これは同型の連続型毛細血管をもつ臓器でもeGCの構成成分が異なり、同薬剤でも臓器によって促進される遺伝子が異なる可能性が示唆された。