H2A.ZとH2A.Xに着目したエピゲノム変化と乳癌発生分子機構の解明

重点关注 H2A.Z 和 H2A.X 阐明乳腺癌发生的表观基因组变化和分子机制

• 批准号: 20K06756
• 负责人: 田辺 真彦
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K06756/
• 关键词: 乳癌; エストロゲン; H2A.Z; H2A.X; エストロゲン受容体; エピゲノム; 相同組み換え修復

エストロゲン刺激依存的乳癌発生分子機構の解明にあたり、ERα標的遺伝子の中でH2A.Z, H2A.Xの双方が遺伝子プロモーター領域に存在する遺伝子群の絞り込みを行った。この中にはHBOC症候群の原因遺伝子であるBRCA1/2ではなく、遺伝性乳癌と関連しDNA2本鎖損傷の相同組み換え修復に関わる遺伝子群が含まれていた。このため、BRCA1/2に加え、PALB2, CHEK2, BARD1, ATM, RAD51C, RAD51Dのエストロゲン刺激依存的発現変動を評価することとした。月経サイクルのような周期的エストロゲン刺激が、乳癌の易罹患性に関わる遺伝子群をエピゲノムレベルで制御していることが明らかとなれば、乳癌発生分子機構の一端が明らかになる可能性がある。エピゲノムレベルでBRCA1/2およびPALB2, CHEK2, BARD1, ATM, RAD51C, RAD51Dの発現が抑制されていることがDNA2本鎖損傷の相同組み換え修復不全に直結しているとすれば、体細胞レベルでhomologous recombination deficiency (HRD)を直接評価することの意義が高まる。そこで乳癌細胞株MCF7細胞株を用いて、エストロゲン刺激および枯渇条件下において相同組み換え修復にかかわる遺伝子の発現に変化を認めるか、ウエスタンブロッティングを用いて検討した。48時間のエストロゲン刺激やエストロゲン枯渇状態では発現タンパク質量に変化をうかがわせるデータは出なかった。さらに長く8日間のエストロゲン刺激状態、エストロゲン枯渇状態さらにエストロゲン枯渇と刺激を繰り返すサイクルとういった条件で検討したところ、ウエスタンブロッティングのバンドで一部のタンパク質発現が変化している可能性があるデータを得た。この再現性を得るために同様の実験を繰り返したが、エストロゲン刺激に応じて発現が低下するDNA2本鎖損傷の相同組み換え修復因子群は明らかとはならなかった。

The molecular mechanism of breast cancer development depends on stimulation. Among the genes H2A.Z and H2A.X, there are two genes in the field of breast cancer development. The BRCA1/2 gene is the cause of HBOC syndrome, and the BRCA1/2 gene is the cause of breast cancer. The BRCA1/2 gene is related to DNA2 gene lock damage. BRCA1/2, PALB2, CHEK2, BARD1, ATM, RAD51C, RAD51D, and their stimulus-dependent activation are evaluated. The risk of breast cancer is related to the risk of breast cancer. The risk of breast cancer is related to the risk of breast cancer. The expression of BRCA1/2 and PALB2, CHEK2, BARD1, ATM, RAD 51C, RAD51D is inhibited by direct evaluation of the same component of DNA2 intrinsic lock damage, incomplete repair, and somatic recombination deficiency (HRD). The breast cancer cell line MCF7 was treated with the same group of drugs under different conditions. 48. Time to Stimulate, Time to Die, Time to Die 8 days ago, the probability that the stimulus state, the stimulus state, and the stimulus state will change will be determined. The same set of repair factors were found in the DNA2 gene lock damage.