Elucidation of the infection mechanism of Trichosporon asahii, a pathogenic fungus resident in the environment

阐明环境中的致病真菌朝日毛孢子菌的感染机制

• 批准号: 20K07022
• 负责人: 松本 靖彦
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Meiji Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07022/
• 关键词: 真菌; 感染; 遺伝子欠損株; カイコ; トリコスポロン・アサヒ; 感染症; 遺伝子組換え; トリコスポロン

トリコスポロン・アサヒは、好中球が減少した患者に対しては重篤な深在性真菌症を引き起こす臨床上問題となっている病原真菌である。しかし、これまでにトリコスポロン・アサヒの病原性を評価するための感染動物モデルがなく、またトリコスポロン・アサヒの遺伝子組換え技術が確立されていなかった。本研究の目的は、環境常在性の病原真菌であるトリコスポロンの感染機構を分子生物学的に解明するための基盤技術の構築である。令和２年度では、簡便にトリコスポロン・アサヒの病原性を評価するためのカイコ感染モデルの確立に成功した。また、アグロバクテリウムを用いた遺伝子導入法によりトリコスポロン・アサヒにGFPを発現させることに成功した。令和３年度では、トリコスポロン・アサヒの遺伝子欠損株を作製するための方法を確立した。令和２年度に確立したアグロバクテリウムを用いた遺伝子導入法を用いて、非相同組換え修復に関与するKu70タンパク質をコードするku70遺伝子の欠損株を樹立した。このku70遺伝子欠損株は、野生株より標的とする遺伝子領域に対する相同組換え効率が上昇していた。これは、Ku70タンパク質を介した非相同末端連結による非特異な遺伝子挿入が起こらなくなり、標的とする遺伝子領域で相同組換えが起きる頻度が上昇したことによると考えている。令和４年度では、ku70遺伝子欠損株を親株として用い、エレクトロポレーション法とJoint PCR法を組合わせた方法で、大腸菌での遺伝子クローニングを行うことなくトリコスポロン・アサヒの遺伝子欠損株を樹立する方法を開発した。これらの結果から、カイコ感染モデルを用いたトリコスポロン・アサヒの病原性の評価系、およびku70遺伝子欠損株を親株とした迅速簡便な標的遺伝子の欠損株を樹立する技術が構築できたと考えられる。トリコスポロン属真菌での遺伝子欠損株の樹立は本研究が初めてである。

The number of patients with fungal infections decreased, and the number of patients with fungal infections increased. The technology of sub-assembly of infected animals was established. The aim of this study was to elucidate the mechanisms of infection of environmentally persistent pathogenic fungi and to construct a molecular DNA template. In 2002, we successfully established a simple and effective method for evaluating the pathogenicity of the virus. The GFP gene was successfully introduced into the genome of the virus. In the third year of this year, the method of controlling the loss of seeds was established. In 2002, we established a new method of gene introduction, which was used in different groups to repair the defective plants of Ku70 gene. The rate of change of the same group of plants in the field of transmission increased when the plants were damaged and wild. The frequency of the same group of sub-domains increases. In 2004, a method for the establishment of defective strains of Escherichia coli was developed by combining the methods of reverse transcription, reverse transcription and Joint PCR with the methods of reverse transcription, reverse transcription and joint PCR. The results of this study are as follows: 1. Pathogenic evaluation system, 2. rapid and simple establishment of defective strain of target strain A preliminary study on the establishment of defective strains of fungi belonging to the genus Trigonum

项目成果

医療器具素材表面でのCandida albicans によるバイオフィルム形成のin vivo 評価システムの開発

医疗器械材料表面白色念珠菌生物膜形成体内评估系统的开发

• 发表时间: 2020
• 作者: 松本靖彦;倉門早苗;杉田 隆
• 通讯作者: 杉田 隆

病原真菌Trichosporon asahiiのストレス抵抗性における転写因子Crz1の役割

转录因子Crz1在病原真菌旭化毛孢子菌抗逆性中的作用

• 发表时间: 2023
• 作者: 清水 優太;松本 靖彦;吉友 桂;遠藤 寿伶希;杉田 隆
• 通讯作者: 杉田 隆

病原真菌Trichosporon asahiiの感染機構の理解のための遺伝学的手法の開発

开发遗传学方法来了解病原真菌 Asahii 的感染机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 松本靖彦;山田剛;杉田 隆
• 通讯作者: 杉田 隆

エレクトロポレーション法を用いた病原真菌Trichosporon asahiiの遺伝子欠損株の作出

利用电穿孔法创建致病性真菌 Asahii 基因缺陷菌株

• 发表时间: 2021
• 作者: 吉川麻美;松本靖彦;長町多恵;山田 剛;杉田 隆
• 通讯作者: 杉田 隆

病原真菌Trichosporon asahiiのストレス抵抗性機構におけるhog1遺伝子の役割

hog1基因在病原真菌旭化毛孢子菌抗逆机制中的作用

• 发表时间: 2021
• 作者: 杉山 悠;松本靖彦;吉川麻美;長町多恵;杉田 隆
• 通讯作者: 杉田 隆