新規S1P輸送体MFSD2Bの創傷治癒における役割と活性制御機構の解明

阐明新型S1P转运蛋白MFSD2B在伤口愈合中的作用和活性调节机制

基本信息

批准号：
20K07059
负责人：
小林直木
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Setsunan University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

赤血球と血小板はどちらもS1P輸送体のMFSD2Bを発現しており、MFSD2Bを介して細胞内のS1Pを細胞外へ放出する。しかしながら、赤血球からのS1P放出が恒常的であるのに対し、血小板からのS1P放出は細胞の活性化に依存する点で大きく異なっている。赤血球由来のS1Pが血漿に含まれるS1Pの主な供給源になっているのに対し、活性化した血小板から放出されるS1Pは、創傷部位において血管新生・細胞増殖・細胞遊走などを促進すると考えられている。私は赤血球・血小板におけるMFSD2Bの活性制御機構を明らかにするため、MFSD2Bのリン酸化に着目し、生化学的解析を行っている。これまでに、C末端に3xFLAGタグを融合したMFSD2B（MFSD2B-C3FLAG）の最適な精製条件を検討し、MFSD2B-C3FLAGが培養細胞内でリン酸化されることを明らかにした。さらに、MFSD2Bのアミノ酸残基のうち、リン酸化される可能性のある33個のセリン・スレオニン残基をすべてアラニン残基へ置換した場合、MFSD2Bは全くリン酸化されず、S1P輸送活性も完全に消失することを見出している。2022年度は、MFSD2Bを3つの領域（Ser26-Thr181, Thr215-Ser348, Thr367-Ser502）に分割し、それぞれの領域に存在する推定リン酸化残基をAla置換したMFSD2Bの変異体をすべての組み合わせで構築した。その結果、MFSD2BのSer26-Thr181またはThr367-Ser502に存在する推定リン酸化残基をAla置換した場合に、MFSD2Bのリン酸化およびS1P輸送活性はいずれも大きく減少したことから、これらの領域のセリン・スレオニン残基のリン酸化がS1P輸送活性に重要である可能性が示唆された。

红细胞和血小板都表达S1P转运蛋白MFSD2B，该转运蛋白MFSD2B通过MFSD2B向外释放细胞内S1P。但是，虽然从红细胞释放S1P是组成型，但S1P从血小板中释放出明显不同，因为它取决于细胞的激活。虽然红细胞衍生的S1P是血浆中包含的S1P的主要来源，但被认为是从活化血小板中释放出的S1P来促进伤口部位的血管生成，细胞增殖，细胞迁移等。我一直在进行生化分析，通过重点关注红细胞和血小板中MFSD2B的磷酸化，以阐明控制红细胞和血小板中MFSD2B活性的机制。到目前为止，我们研究了MFSD2B（MFSD2B-C3FLAG）的最佳纯化条件，该条件在C末端融合了3XFLAG标签，并揭示了MFSD2B-C3Flag在培养的细胞中磷酸化。此外，已经发现，如果所有33个可以从MFSD2B的氨基酸残基中磷酸化的丝氨酸 - 硫代残基被丙氨酸残基取代，则MFSD2B根本不会完全消失，而S1P转运活性完全消失了。 In 2022, MFSD2B was divided into three regions (Ser26-Thr181, Thr215-Ser348, Thr367-Ser502) and all combinations of MFSD2B mutants in which putative phosphorylated residues present in each region were replaced by Ala. As a result, when Ala substitution of putative phosphorylation residues present in Ser26-Thr181 or在MFSD2B中进行了THR367-SER502，MFSD2B的磷酸化和S1P转运活性显着降低，这表明这些区域中丝氨酸 - 硫代氨酸残基的磷酸化可能对S1P转运活性很重要。

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

シメチジン類縁体を用いたヒトMATE1輸送体阻害作用の構造活性相関研究

使用西咪替丁类似物抑制人 MATE1 转运蛋白的构效关系研究

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
新屋進;河合健太郎;小林直木;軽尾友紀子;樽井敦;佐藤和之;大塚正人;表雅章
通讯作者：
表雅章

赤血球・血小板S1P輸送体MFSD2Bの活性制御機構の解析

红细胞/血小板S1P转运蛋白MFSD2B活性调控机制分析

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
小林直木;中村透唯;大塚正人;西毅
通讯作者：
西毅

S1P輸送体MFSD2Bの活性制御機構の解析

S1P转运蛋白MFSD2B活性控制机制分析

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
小林直木;金澤豊;中村透唯;大塚正人;西毅
通讯作者：
西毅

Fluorophenylalkyl-substituted cyanoguanidine derivatives as bacteria-selective MATE transporter inhibitors for the treatment of antibiotic-resistant infections

氟苯烷基取代的氰基胍衍生物作为细菌选择性 MATE 转运蛋白抑制剂用于治疗抗生素耐药性感染

DOI：
10.1016/j.bmc.2022.117042
发表时间：
2022
期刊：
Bioorganic & Medicinal Chemistry
影响因子：
3.5
作者：
Susumu Shinya;Kentaro Kawai;Naoki Kobayashi;Yukiko Karuo;Atsushi Tarui;Kazuyuki Sato;Masato Otsuka;Masaaki Omote
通讯作者：
Masaaki Omote

トランスポーターが制御する体内の脂質輸送

体内脂质运输由转运蛋白控制