Elucidation of the regulatory mechanism of integrin-harboring vesicles for the suppression of pathogenic vesicles
阐明携带整合素的囊泡抑制致病性囊泡的调节机制
基本信息
- 批准号:20K07331
- 负责人:
- 金额:$ 2.83万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2020
- 资助国家:日本
- 起止时间:2020-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究課題では, リンパ球の活性化やホーミングの過程において細胞間接着を介して重要な働きを担う接着分子である白血球インテグリンLFA-1を含む小胞の生成・輸送過程に注目し,その制御機構の解明を目指して実験を進めている。本年度は、前年度までに確立したスピニングディスク型超解像共焦点顕微鏡Dragonflyを用いたイメージング手法を用いて、様々な因子との共局在を超解像レベルで解析し、LFA-1の輸送に関わる因子をいくつか同定した。前年度までの解析からLFA-1のリガンドであるICAM-1の結合依存的に誘導されるシグナル (outside-in シグナル)依存的にLFA-1細胞内小胞が顕著に形成されることをLFA-1に融合させたSNAPtagを生きた細胞内で共有結合により蛍光標識して可視化することにより明らかにしていた。リンパ球にoutside-inシグナルをICAM-1やLFA-1の活性型構造を特異的に認識するモノクローナル抗体を用いて導入した後にパラホルムアルデヒドで固定しLFA-1含有小胞に局在する分子を蛍光免疫染色により調べたところ、この小胞にはRab7やRab8が特異的に共局在した。CRISPR-Cas9法を用いてRab7やRab8が欠損したリンパ球を作製し、その細胞接着能を調べたところ、接着能は野生型と比べて有意に低下した。さらに、細胞接着面におけるLFA-1の集積度合をLFA-1の機能に影響を与えない抗LFA-1抗体を用いて評価したところ、Rab7やRab8欠損リンパ球では集積が顕著に低下していることが明らかになった。以上の結果からRab7やRab8はoutside-in刺激依存的にLFA-1の接着面への輸送を制御する新規の因子であることが示唆された。
This research topic is The activation process of リンパパのやホーミングの process においてThe cell-to-cell connection を-mediated してThe important な働きを恆Then the molecule であるwhite blood cell インテグリンLFA-1 has a focus on the production and transport process of the cells, and a clear explanation of the control mechanism. This year and the year before, the Dragonfly type super-resolution confocal micromirror, which was established in the previous year, has been established. Techniques include using いて, 様々なfactor and との国产 in をsuper-resolution imaging レベルでanalytics, LFA-1 のtransport に关わるfactor をいくつか同定した. Analysis of the previous year's analysis of LFA-1 のリガンドであるICAM-1's binding-dependent にinducing されるシグナル (outside-in SN APtag is a common combination of intracellular and intracellular light tags, which can be visualized by visualizing it.リンパにoutside-inシグナルをICAM-1やLFA-1のlive Sex type structure specific に recognition するモノクローナルantibody を introduced した后にパラホ using いてルムアルデヒドでfixed LFA-1 containing small cells and localized in the molecule and light immunostainingより片べたところ, この小cellにはRab7やRab8がSpecial に合bureau in した. The CRISPR-Cas9 method uses Rab7 and Rab8, which are defective and can be used to produce cells. The cells can then be adjusted and the cells can be used to produce wild-type cells that are intentionally lower than those of wild-type cells. The concentration of LFA-1 on the cell adhesion surface and the influence on the function of LFA-1 are used with the anti-LFA-1 antibodyいて Comment価したところ, Rab7やRab8 owed the リンパball ではCollection が顕在にlow していることが明らかになった. The above results show that Rab7 and Rab8 are stimulated outside the LFA-1-dependent surface and transport the new factor.
项目成果
期刊论文数量(20)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Single-molecule dissection of leukocyte integrin LFA1 activation mechanism
白细胞整合素LFA1激活机制的单分子解析
- DOI:
- 发表时间:2023
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Kondo;N.;Ueda;Y.;and Kinashi;T.
- 通讯作者:T.
インテグリン活性化因子の局所的運動特性の違いによる免疫細胞移動メカニズムの解明
基于整合素激活剂局部运动特征差异阐明免疫细胞迁移机制
- DOI:
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:近藤直幸;植田祥啓;南暁彦;真上薫;木梨達雄
- 通讯作者:木梨達雄
Rap1/Talin-1/Kindlin-3を内包する新規ポジティブフィードバック回路によるインテグリン活性化の離散的制御
通过包含 Rap1/Talin-1/Kindlin-3 的新型正反馈电路离散控制整合素激活
- DOI:
- 发表时间:2020
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:近藤直幸;植田祥啓;木梨達雄
- 通讯作者:木梨達雄
構造解析コンソーシアムの発展と活用による分子に基づいた分野横断型橋渡し研究への展開
开发和利用结构分析联盟开展基于分子的跨学科转化研究
- DOI:
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:近藤直幸,片野泰代;赤間智也;池田幸樹;鈴木健介;富山尚;寿野良二;神田晃;八木正夫;岩井大
- 通讯作者:岩井大
Rap1 facilitates T cell polarity via spatial regulation of MLC and ARAP1
Rap1 通过 MLC 和 ARAP1 的空间调节促进 T 细胞极性
- DOI:
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Y. Ueda;K. Higasa;Y. Kamioka;N. Kondo;T. Kinashi,
- 通讯作者:T. Kinashi,
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- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
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- 发表时间:
2016 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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久保倫子・駒木伸比古・田中健作
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