Role of membrane lipid-modulated signal transductions in endotoxin hyperresponse of fatty livers

膜脂调节信号转导在脂肪肝内毒素高反应中的作用

• 批准号: 20K07349
• 负责人: Qin XianYang
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07349/
• 关键词: 非アルコール性脂肪性肝炎; 脂肪肝; トランスグルタミナーゼ; エンドトキシン; 微小環境; マルチオミクス解析; ホスファチジルエタノールアミン; LIMK1; in situイメージング; NASH; 膜脂質; 膜タンパク質

本研究では、脂肪肝の微小環境において細菌性エンドトキシン（LPS）誘発性炎症反応並びに非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）の発症において分子間接着因子トランスグルタミナーゼ（TG2）の役割の解明を目的とする。本年度は、１）NASH病態STAMマウスと高濃度LPS誘発性炎症マウスにおいて、TG2は肝組織中CD80＋F4/80＋M1型マクロファージに特異的に活性化されることを見出した。RNA-seq解析を用いて、クロドロン酸内包リポソーム投与によりマクロファージ排除したマウスとTG2阻害剤シスタミン（CTM）投与マウスにおいて、LPS刺激による肝組織中の遺伝子発現変化を比較し、LPS刺激に対する同様な炎症抑制効果を示した。2）ヒト肝がん細胞JHH7とマウスマクロファージ細胞 Raw264.7を用いて、ホスファチジルエタノールアミン（PE）処理によるLPS応答性への影響を検証した。IL-6遺伝子発現はPEの前処理によりLPS刺激に対する反応性が有意に増加した。3）Raw264.7細胞を用いてLPS刺激とTG2活性化の関連性を検証した。Raw264.7細胞においてLPS処理によりTG2の架橋酵素活性と遺伝子・タンパク質発現が有意に増加した。CTMは、LPSによるIL-6やTNFα遺伝子発現の上昇やマクロファージの細胞死が有意に抑制した。さらに、LPSで刺激したマクロファージの培地から得られた上清を用いて、条件培地（CM）を作成した。このCMは正常肝細胞HcのIL-6遺伝子を強く誘導したが、CTM添加により有意に抑制された。これらの結果から、TG2はLPS-TLRシグナルカスケードだけでなく、LPS刺激による分泌されるサイトカインやその下流受容体シグナルカスケード、そして炎症微小環境においてマクロファージと肝細胞との細胞間相互作用にも関与していることが示唆された。

The purpose of this study is to clarify the role of the intermolecular binding factor lanstatamina (TG2) in the microenvironment of fatty liver, the inflammatory response induced by bacterial endostatin (LPS), and the pathogenesis of non-alcoholic steatohepatitis (NASH). This year, 1) NASH pathological STAM, high concentration LPS induced inflammation, TG2 type CD80 +F4/80+M1 specific activation, was observed in liver tissue. RNA-seq analysis was used to compare the expression of mRNA in liver tissue with LPS stimulation and to demonstrate the effect of LPS stimulation on the inhibition of inflammation. 2) To investigate the effect of LPS on the response of JHH7 cells treated with PE. IL-6 gene expression was intentionally increased in response to LPS stimulation prior to PE. 3) The relationship between LPS stimulation and TG2 activation in Raw264.7 cells was demonstrated. Raw264.7 cells were treated with LPS, and the activity of TG2 bridging enzyme and protein expression were intentionally increased. CTM, LPS, IL-6 and TNFα gene production increased and cell death was intentionally inhibited. In addition, LPS can be used to stimulate the development of the environment. These CM cells are strongly induced by IL-6 gene in normal hepatocytes and are intentionally inhibited by CTM addition. The results showed that TG2 was related to LPS-TLR, LPS stimulation, secretion, and cellular interaction in liver cells in inflammatory microenvironment.

项目成果

分子間接着因子活性化のin vivoイメージングによるエンドトキシン刺激肝臓の微小環境解析

通过分子间粘附因子激活的体内成像分析内毒素刺激的肝脏微环境

• 发表时间: 2020
• 作者: 秦咸陽;古谷裕
• 通讯作者: 古谷裕

トランスグルタミナーゼ2を標的とする肝がん幹細胞の増殖制御と分子機構解明

靶向转谷氨酰胺酶2的肝癌干细胞生长调控及分子机制阐明

• 发表时间: 2021
• 作者: Shiraishi Yasuyuki;Kimura Atsushi;Kimura Hiroaki;Ohmori Tsukasa;Takahashi Masafumi;Takeshita Katsushi;秦咸陽，小嶋聡一
• 通讯作者: 秦咸陽，小嶋聡一

Integrative Approaches of Bioassay and Computational Analysis for Discovering Potential Bioactive Compounds and Predictive Toxicity

用于发现潜在生物活性化合物和预测毒性的生物测定和计算分析的综合方法

• DOI: 10.3177/jnsv.68.s131
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Nutritional Science and Vitaminology
• 影响因子: 1.6
• 作者: SONE Hideko;QIN Xian-Yang;HAYAMIZU Kohsuke;FUJIBUCHI Wataru;NAKAO Yoichi
• 通讯作者: NAKAO Yoichi

トランスグルタミナーゼを標的とした敗血症治療への応用と分子基盤の理解

转谷氨酰胺酶治疗脓毒症的应用及其分子基础的理解

• 发表时间: 2021
• 作者: Yoshimura Kaori;Tamano Yuko;Nguyen Canh Hiep;Zihan Li;Le Thanh Dong;Sato Yasunori;Terashima Takeshi;Shimoda Shinji;Harada Kenichi;秦咸陽，Ting Su，古谷裕，小嶋聡一
• 通讯作者: 秦咸陽，Ting Su，古谷裕，小嶋聡一

Design, synthesis and antitumor activity of phthalazine-1,4-dione-based menaquinone analogs

• DOI: 10.1016/j.bmcl.2021.128065
• 发表时间: 2021-05-06
• 期刊: BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS
• 影响因子: 2.7
• 作者: Fujii, Shinya;Miura, Takahiro;Kagechika, Hiroyuki
• 通讯作者: Kagechika, Hiroyuki