Construction of evaluation system for novel PPI inhibitors based on the Hippo pathway in the model organism C.elegans

Hippo pathwayは、生体内において細胞の増殖、器官のサイズ、腫瘍の抑制、発生や再生の制御といった生命活動で重要な働きに関係しているシグナル伝達経路であり、ヒトだけでなく多くの動物に進化的に保存されていることが知られている。本研究で使用する線虫の一種Caenorhabditis elegansは体長が約1 mmと小さく、卵から成虫まで約3日で成長するため、マウスなどに比べ大きな飼育設備を必要とせず、短期間に大量に培養することが利点であり、また体が透明であるため顕微鏡観察に適している。本研究ではHippo pathwayのコンポーネントをノックダウンしたモデル線虫を作成して表現型の変化を詳細に観察すること、新規PPI阻害剤を用いて形態変化を回復する化合物を同定することを目的とし、Hippo pathwayを制御する薬剤評価システムの構築を目指している。2020年度には、Hippo pathwayコンポーネントのひとつであるYAPをノックダウンした線虫を作成し、成虫の陰門が突出した形態変化を観察することができた。2021年度には、YAPに加えて 3つのコンポーネントについてそれらの遺伝子単独とそれらの組み合わせを欠失した線虫を作成して形態観察を行い、陰門突出の他に体長にも差が生じることが分かった。また、YAP阻害剤であるVerteporfinを用いて実験をしたところ、陰門突出の割合に差が生じることが分かった。2022年度は遺伝子の組み合わせと形態変化、阻害剤の効果についてさらに比較検討し、C. elegansをモデル生物とした薬剤効果評価システムの構築を目指した。

Hippo pathwayは、生体内において細胞の増殖、器官のサイズ、腫瘍の抑制、発生や再生の制御といった生命活動で重要な働きに関係しているシグナル伝達経路であり、ヒトだけでなく多くの動物に進化的に保存されていることが知られている。本研究で使用する線虫の一種Caenorhabditis elegansは体長が約1 mmと小さく、卵から成虫まで約3日で成長するため、マウスなどに比べ大きな飼育設備を必要とせず、短期間に大量に培養することが利点であり、また体が透明であるため顕微鏡観察に適している。本研究ではHippo pathwayのコンポーネントをノックダウンしたモデル線虫を作成して表現型の変化を詳細に観察すること、新規PPI阻害剤を用いて形態変化を回復する化合物を同定することを目的とし、Hippo pathwayを制御する薬剤評価システムの構築を目指している。2020年度には、Hippo pathwayコンポーネントのひとつであるYAPをノックダウンした線虫を作成し、成虫の陰門が突出した形態変化を観察することができた。2021年度には、YAPに加えて 3つのコンポーネントについてそれらの遺伝子単独とそれらの組み合わせを欠失した線虫を作成して形態観察を行い、陰門突出の他に体長にも差が生じることが分かった。また、YAP阻害剤であるVerteporfinを用いて実験をしたところ、陰門突出の割合に差が生じることが分かった。2022年度は遺伝子の組み合わせと形態変化、阻害剤の効果についてさらに比較検討し、C. elegansをモデル生物とした薬剤効果評価システムの構築を目指した。