結核に対するシアリダーゼを用いた新規ナノ粒子ワクチンの開発

利用唾液酸酶开发新型纳米颗粒疫苗来对抗结核病

• 批准号: 20K07800
• 负责人: 榎本 紀之
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07800/
• 关键词: 脂質ナノ粒子; ハイブリッドエピトープ長鎖ペプチド; シアリダーゼ; ナノ粒子ワクチン; ナノ粒子

卵白アルブミン(OVA)由来の細胞障害性T細胞(CTL) およびヘルパーT細胞(Th)エピトープを連結したハイブリッドエピトープ長鎖ペプチド(long epitope)を作成 し、シアル酸・Siglec-G・CD24複合体を分解しTLRシグナルを増強するシアリダーゼと共に、生分解性ナノ粒子(polylactic coglycolic acid: PLGA)と混合し た。これを骨髄由来の樹状細胞(BMDC)へパルスし、抗原特異的リンパ球(OT-I細胞、OT-II細胞)と共培養したところ、long epitope単独群と比較し、OT-I細胞 (CTL)、OT-II細胞(Th)の強い増殖能を確認した。以上の結果から、long epitope + PLGAによるワクチンは、シアリダーゼを添加することによりさらに強力なワクチン療法となる可能性がある。しかし、実験回数を増やしているものの、未だに有意差は認められていない。また、シアリダーゼと、担体であるPLGAの相互作用の問題が存在す る可能性もある。そこで次に、脂質ナノ粒子(LNP)を担体としたワクチンの作成に着手した。今回、既に作成したlong epitopeをマイクロ流路を用いてLNPに内包したLNPナノ粒子ワクチンの作成に成功した。マイクロ流路による混合時のpHなどを滴定し、long epitopeの十分な内包率を確認した。今後、このlong epitope/LNPナノ粒子ワクチンの免疫誘導能を検討する予定である。

A long epitope of CTL derived from OVA was prepared by the cleavage of Siglec-G CD24 complex and the mixing of polycystic acid (PLGA) and TLR. The proliferation of BMDC cells, antigen-specific spheres (OT-I cells, OT-II cells), co-culture of OT-I cells and OT-II cells was confirmed by comparison with OT-I cells (CTL) and OT-II cells (Th). The above results show that there is a possibility that long-term epitope + PLGA therapy can be used. In the middle of the day, the number of people who have returned to China has increased, and the number of people who have returned to China has increased. The possibility of PLGA interaction exists. The preparation of lipid nanoparticles (LNP) is under way. Now, since the long epitope was created, the LNP was successfully created. The pH of the mixture is titrated and the inclusion rate of the long epitope is confirmed. In the future, this long epitope/LNP particle immune induction model will be discussed in detail.