胎内環境下におけるサイトメガロウイルスの新たな垂直感染機構の解明

阐明子宫内环境中巨细胞病毒的新垂直感染机制

• 批准号: 20K08213
• 负责人: 生田 和史
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tohoku Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K08213/
• 关键词: サイトメガロウイルス; 先天性感染; ウイルス; 胎内感染

サイトメガロウイルス（Cytomegalovirus, CMV）は多くの成人に不顕性感染している反面、胎内感染の病原体でもある。妊娠中のCMV感染は高率に先天感染を引き起こす。死産や流産の原因であるほか、全出産の約0.3％ではCMV感染が認められ、そのうち約30％は黄疸、肝脾腫、脳内石灰化や聴覚障害等を伴う顕性感染である。胎内におけるCMV感染の詳細は不明である。胎盤環境がCMV感染に及ぼす影響を検討し、先天感染の詳細機構を明らかにすることが本研究の目的である。ヒト第19番染色体に存在する約100kbpのマイクロRNA cluster（C19MC）に着目した。C19MCは霊長類の胎盤で特異的に高発現する46個のmicroRNAをコードしており、抗ウイルス機構に関与することが報告されている。C19MC bacterial artificial chromosome（BAC）を導入した細胞にCMV（AD169株またはTowne株）を感染させ、C19MCの有無による感染効率を比較した。昨年度までにC19MC導入細胞において、胎盤特異的マイクロRNAの高発現を確認した。CMVを感染させ、C19MCによるウイルス感染亢進を確認した。CMV前初期遺伝子（Immediate Early, IE）発現量、IE陽性細胞数、感染細胞から生じるウイルス量はC19MC BAC導入細胞で顕著に増大することを確認した。C19MC BAC導入細胞ではCMV受容体の発現変動は認められず、ウイルス吸着量にも変化は認められなかった。C19MCによるCMV IEの発現増強が、転写レベルで起こっていることを証明した。その誘因となる宿主側遺伝子の候補を見出し、確認実験を遂行中である。

巨细胞病毒（CMV）是亚临床感染的许多成年人，但也是宫内感染的病原体。怀孕期间的CMV感染会引起高先天性感染。除了死胎和流产的原因外，所有出生的大约0.3％都患有CMV感染，其中约30％是明显的感染，伴随着黄疸，肝脾肿大，脑钙化和听力损失。子宫中CMV感染的细节尚不清楚。这项研究的目的是检查胎盘环境对CMV感染的影响，并阐明先天性感染的详细机制。我们专注于大约100 kbp的microRNA簇（C19MC），该簇位于人类染色体19。C19MC编码46个MicroRNA上，这些MicroRNA在灵长类动物的胎盘胎盘中特别表达，并据报道与抗病毒机制有关。用CMV（AD169或Towne菌株）感染了用细菌人造染色体（BAC）转染的C19MC细胞，并根据C19MC的存在或不存在感染效率。截至去年，在C19MC转导的细胞中证实了胎盘特异性的MicroRNA的高表达。该病毒被CMV感染，并证实C19MC的病毒感染增加。证实CMV早期基因（IE）的表达水平，IE阳性细胞的数量以及从感染细胞产生的病毒载量显着增加，在C19MC BAC TRANSDONDSDSDSD的细胞中显着增加。在C19MC BAC转导的细胞中未观察到CMV受体表达的变化，并且吸附的病毒量没有变化。我们证明，C19MC的CMV IE表达增强发生在转录级别。发现这将触发的候选宿主基因，并进行了确认实验。

项目成果

改変コンディショナルリプログラミング法によるEBウイルス陽性胃がん細胞株化の試み

尝试使用改良的条件重编程方法创建 EB 病毒阳性胃癌细胞系

• 发表时间: 2022
• 作者: 神田 輝;北村大志;生田和史;清野 透
• 通讯作者: 清野 透

先天性サイトメガロウイルス感染症と難聴 分担執筆部分「先天性サイトメガロウイルス感染による難聴発症メカニズム」

先天性巨细胞病毒感染与听力损失合着部分：《先天性巨细胞病毒感染导致听力损失的发病机制》

• 发表时间: 2021
• 作者: 池住洋平，近藤朋実;松本祐嗣;熊谷直憲;Katsumi Mizuno;生田和史
• 通讯作者: 生田和史

A global phylogenetic analysis of Japanese tonsil-derived Epstein-Barr virus strains using viral whole-genome cloning and long-read sequencing

使用病毒全基因组克隆和长读长测序对日本扁桃体来源的 Epstein-Barr 病毒株进行全球系统发育分析

• DOI: 10.1099/jgv.0.001549
• 发表时间: 2021
• 期刊: Journal of General Virology
• 影响因子: 3.8
• 作者: Yajima Misako;Kakuta Risako;Saito Yutaro;Kitaya Shiori;Toyoda Atsushi;Ikuta Kazufumi;Yasuda Jun;Ohta Nobuo;Kanda Teru
• 通讯作者: Kanda Teru

加美町産ムラサキの抽出物における抗インフルエンザウイルス効果

加美镇紫色提取物的抗流感病毒作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 佐藤由紀恵;生田和史;神田 輝;佐々木健郎
• 通讯作者: 佐々木健郎

ヒト検体由来EBウイルス陽性胃がん細胞のコンディショナルリプログラミング法による長期継代培養

使用条件重编程方法长期传代源自人类标本的 EBV 阳性胃癌细胞

• 发表时间: 2021
• 作者: 神田輝;生田和史
• 通讯作者: 生田和史