乳歯歯髄幹細胞培養上清由来因子を用いた新規皮膚炎治療法の検討

利用乳牙牙髓干细胞培养上清液衍生因子研究新的皮炎治疗方法

• 批准号: 20K08690
• 负责人: 橋本 登
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K08690/
• 关键词: 炎症性皮膚疾患; Atopic dermatitis; 乳歯歯髄幹細胞培養上清; Siglec-9; マクロファージ; CD4+T細胞; 乾癬; 抗炎症; 皮膚バリア; 皮膚炎; 組織再生

ヒト歯髄幹細胞培養上清(SHED-CM)において同定された分泌型Siglec-9(sSiglec-9)による炎症性皮膚疾患に対する抗炎症・皮膚バリア再生効果を検討するために 以下の検討を行った。 卵白アルブミン(OVA)誘導アトピーマウスに対しsSiglec-9の尾静脈投与をおこなった。その結果、sSiglec-9投与群では対照群に比べ、皮膚の肥厚や肥満細胞の誘導を抑制し抗炎症効果があることが示された。sSiglec-9を含有するSHED-CMをアトピーマウスに投与し、二次リンパ組織である脾臓の解析を行った。炎症時にはリンパ小節において胚中心が見られ、免疫系の細胞の成熟化が起こる。SHED-CM投与マウスでは対象群に比べ胚中心の形成が抑制されていた。また、CD4+細胞（CD4＋T細胞）の局在に変化が見られた。このことからSHED-CMは炎症部だけではなく二次リンパ組織に対しても抗炎症効果を示すことが示唆された。結合時におけるsSiglec-9薬理活性の解析を行った。 sSiglec-9が炎症系M1マクロファージの活性制御を示すことがわかっている。Siglec-9のリガンド糖鎖キャリアタンパクの同定を行うためにLC/MSによる網羅的解析を行った。マクロファージ様細胞RAW264.7に対しSiglec-9-Fcを用い免疫沈降を行いLC/MSに供した。この結果からSiglec-9特異的に結合する3つの分子を同定した。マウス骨髄由マクロファージに対し3分子に対する特異的な抗体を用いウエスタンブロッティングを行ったところ同様な結果が得られたことからこれら3分子はSiglec-9が特異的に認識するマクロファージに共通している分子であることが示唆された。これら3つの分子の意義を検討している。

The following procedures were carried out in the study of anti-inflammatory and regenerative effects of inflammatory skin disorders in the culture supernatant (SHED-CM) of human dental stem cells. OVA is an induction pathway for Siglec-9. As a result, sSiglec-9 was injected into the group, which inhibited the induction of hypertrophic cells and anti-inflammatory effects. Siglec-9 contains the following information: During inflammation, the embryo center is seen in the small section, and the maturation of the immune system cells is initiated. SHED-CM projects and controls the formation of anti-image clusters rather than embryo centers. CD4 + cells (CD4 +T cells) are in the process of transformation. The SHED-CM is an anti-inflammatory agent. It is a secondary anti-inflammatory agent. The analysis of Siglec-9 biological activity in binding time was carried out. sSiglec-9 is an active inhibitor of inflammation in M1. Siglec-9's free range of sugar locks is consistent with LC/MS's network resolution. RAW264.7 is the first time that Siglec-9-Fc has been used in LC/MS. The result is that Siglec-9 binds specifically to three molecules. The result is that the three molecules are specific to each other. The meaning of three molecules is discussed.