単球の細胞外トラップス形成とPAD4制御による、 関節リウマチの発症予防戦略

通过单核细胞胞外陷阱形成和 PAD4 调节预防类风湿关节炎发作的策略

• 批准号: 20K08783
• 负责人: 岡本 祐子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K08783/
• 关键词: 関節リウマチ; 単球細胞外トラップス; シトルリン化; 単球

本研究代表者は、抗CCP抗体陽性関節リウマチ（RA）発症ハイリスク者の末梢血単球において、Toll-like受容体刺激によるPAD4を介した単球細胞外トラップス形成と炎症性サイトカイン産生が亢進していることを見出した。本研究では、末梢血単球細胞外トラップス形成の分子メカニズム、細胞内メタボリズム、エピジェネティック制御、更にPAD4遺伝子多型との関連を明らかにし、RA発症予防に寄与する新規標的分子を同定することを目的とする。RA患者に特異的に認められる抗CCP抗体は、シトルリン化抗原を認識する。その蛋白のシトルリン化を触媒する酵素である、PAD4が単球細胞外トラップス形成とTNFαをはじめとする炎症性サイトカイン産生に関連することに着目して検討を実施した。血中抗CCP抗体陽性だが臨床的な関節炎のないRA発症ハイリスク者、早期RA患者、健常人の末梢血から単球を分離し、刺激後にヒストンH3のシトルリン化、サイトカイン産生、単球細胞外トラップス形成を測定した。健常人に関しては、RAの遺伝リスクであるPAD4の一塩基変異を2つ保有する健常人（T/T）と保有しない健常人（C/C）の差異について注目して検討した。結果、PAD4の一塩基変異を2つ保有する健常人は、保有しない健常人と比較し、有意に高頻度の単球細胞外トラップス形成が認められることを確認した。また、炎症性サイトカインが単球細胞外トラップス形成の促成因子として作用することも見出した。分子機序探索のため、刺激後単球の網羅的mRNAシークエンスの結果の解析を実施した。更に検体数を追加しての、単球細胞外トラップス形成に関連する因子の探索を実施している。

This study was conducted on behalf of anti-CCP antibody-positive joint disease (RA) patients who developed peripheral blood lymphocytes, Toll-like receptor stimulation, PAD4, and cellular inflammation. This study aims to identify molecular markers for extracellular, intracellular, and genetic control of peripheral blood lymphocytes, as well as PAD4 gene polymorphisms, and to identify new markers for RA pathogenesis. RA patient-specific recognition of anti-CCP antibodies and anti-CCP antigen recognition PAD4 is an enzyme responsible for the production of inflammatory cytokines. Anti-CCP antibody positivity in the blood was measured in patients with RA, early RA, and healthy peripheral blood mononuclear cells isolated, stimulated, H3-induced, and extracellular mononuclear cells formed. The difference between healthy people (T/T) and healthy people (C/C) is discussed in detail. The results showed that PAD4 had a high frequency of extracellular space formation, which was confirmed by the comparison of healthy people and healthy people. The role of inflammatory factors in the formation of extracellular proteins in the human body has been demonstrated. Molecular mechanism exploration and analysis of mRNA profiles after stimulation In addition, the number of cells was increased, and the factors related to the formation of extracellular space were explored.