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ctDNAメチル化検出を実装する新たなアプローチによる大腸癌再発早期診断法の確立

ctDNA甲基化检测新方法建立结直肠癌复发早期诊断方法

基本信息

批准号：
20K08930
负责人：
大津甫
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

転移巣を有する大腸癌患者40例の原発巣および健常大腸粘膜、術前後の経時的血漿検体および転移巣を集積した。一方、stage III大腸がんでありながら非再発であった100例の原発巣および健常大腸粘膜、術前後の経時的血漿検体も確保し、まずは血漿検体よりctDNAを抽出した。われわれの教室では大腸がんの再発を来す機序として、マクロファージや線維芽細胞を誘導し、遠隔臓器に転移するニッチを形成するケモカインCCL2に注目していたことから、CCL2がCRCの再発を予測するバイオマーカーとなり得るかどうかを検討した。本助成で集積した検体についてCCL2プロファイルと再発との関係を調べた。その結果、術後6カ月で血漿中のCCL2濃度が有意に上昇し、根治切除後も継続的に上昇した。1年以上の再発例の術後6カ月間のCCL2濃度は、非再発例および1年未満の再発例に比べて有意に高いことを明らかにしたことから、ニッチ形成が重要であることを改めて証明した。当初目標としていた大腸がん検出のための高頻度検出メチル化領域も予定症例について鋭意digital PCRで明らかにしているところである。全部で3領域存在し、初期の11例で検証したところ、AUC0.82と高値を示し、既存の血清CEAを凌駕していた。本研究助成をいただいたことで残りの検体分の核酸抽出試薬やdPCR用試薬を購入させていただいた。おかげで、間もなく結果が得られて、論文発表の予定である。2,3年目はオハイオ州立大学と共同研究にて解析予定であったが、共同研究を行う予定であった、Carlo Croceの研究室へ代表者が留学することとなったため、本科研を廃止することとした。

In 40 patients with primary cancer, the normal mucous membrane and blood samples were collected before and after surgery. On the one hand, stage III made sure that the mucous membrane of the healthy aorta, the blood samples before and after the operation were protected, and the blood samples were extracted from the ctDNA after surgery. In the classroom, you need to know that the machine is in order, that the germ cell guide is connected, and that the separator is moved to make sure that the CCL2 is aware of the situation, and that the CCL2 CRC is responsible for the failure of the computer. The purpose of this study is to help you to collect CCL2 information and then to make sure that you are in a better position. The results showed that the degree of CCL2 in the blood samples of the next 6 months was intentionally elevated, and the symptoms after radical resection were cured. After more than one year, the CCL2 has changed within 6 months, and the non-repeat case has not been renewed for 1 year. It is more important to change the license than if you intend to change it. At the beginning, the purpose of this article is to show that there is a high degree of illness in the field of the disease, which means that digital PCR is clearly aware that there is a high degree of illness. In all 3 fields, there were 11 cases in the early stage, the serum CEA was detected in 11 cases, the serum CEA was detected in the early stage. The purpose of this study is to extract the nucleic acid from the residual DNA of dPCR and use it to enter the virus. The results show that the results are satisfactory, and the table of documents is expected to be accurate. For 2, 3 years, the joint research program of the State University, the representative of the Carlo Croce Research Office, the representative of the research department of the State University, and the representative of the research laboratory of the State University, the representative of the Department of Research and Research, the representative of the Department of Research, has studied abroad.