癌微小環境由来免疫抑制性エクソソームによる癌免疫逃避機構の解析

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前年までのB16腫瘍細胞ー血管内皮細胞の連続培養系を用いたin vitroの実験で腫瘍微小環境を模した培養上清から分離したエクソソームがT細胞抑制性を持つことを明らかとした。このエクソソームをビーズを用いたフローサイトメトリーでの解析により、エクソソーム自体がクラスII、CD40などの副刺激分子を表出し、また抑制性リガンドであるPD-L1も表出することが明らかとなった。これらの結果より、腫瘍微小環境から免疫抑制性のエクソソームが分泌されていることが強く示唆された。次の段階としてOT-I transgenicマウスから分離したOVA特異的CD8＋T細胞とOVAパルスした骨髄由来樹状細胞の共培養下に、培養癌細胞由来エクソソーム用いたin vitro増殖抑制試験を行い、in vitroでの検証を行っている。B16メラノーマ腫瘍株をマウスに接種したin vivoマウス担癌モデルにおいて、炎症惹起アジュバントであるCFAを同時に接種し、炎症下における腫瘍の増殖を検討したところ、CFA接種炎症併存群ではコントロール群と比べ、有意に腫瘍増殖が促進され、炎症物質であるHMGB1中和抗体投与により、増殖促進が抑制されたことから、HMGB1と抑制性エクソソームの因果関係が示唆された。そこで、次の段階としてOT-I transgenicマウスから分離したOVA特異的CD8＋T細胞とOVAパルスした骨髄由来樹状細胞の共培養下に、培養癌細胞由来エクソソーム用いたin vitro増殖抑制試験を行い、in vitroでの検証を行っている。さらにB16-OVAメラノーマ腫瘍株をマウスに接種したin vivoマウス担癌モデルにおいて、免疫抑制性エクソソーム分泌を促進する可能性のあるHMGB1の中和薬剤を投与し、OT-I細胞を移入し抗原特異的免疫反応の解析を行っている。