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Targetting aggresome formation in metastatic breast cancer cells

靶向转移性乳腺癌细胞中的聚集体形成

基本信息

批准号：
20K08970
负责人：
風間宏美
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Tokyo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

難治性乳癌治療を目的として、乳癌細胞株MDA-MB231、MDA-MB468、SKBR3に、ヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)阻害剤であるリコリノスタット(RCS)（HDAC6に対する選択性が高い）と、プロテアソーム阻害剤ボルテゾミブ(BTZ)を同時添加した。その結果、全細胞株で単剤添加と比較して相乗的な殺細胞増強効果を認めた。この効果はHDAC6の特異的阻害試薬TubacinとBTZとの併用でも同様に観察された。Annexin-V陽性/PI陰性細胞の出現ならびにcaspase-3の活性化が弱いことから、古典的アポトーシス経路を介さない細胞死誘導が示唆された。また、ERAI-XBP1-Venusプローブを用いた小胞体（ER）ストレス経時的定量解析法でも、両薬剤併用で顕著にストレス負荷が増大し、それに伴う細胞死の増強とERの膨化も観察された。このERの膨化は、透過型電子顕微鏡による観察においても確認された。ERストレス負荷を示すタンパク質GRP78、p-PERK, p-eIF2αの発現も上昇していた。RCSとBTZの併用によりROS産生が顕著に上昇したが、ミトコンドリアに由来しないROS産生がMitoSOX解析から示された。さらに、ROSのscavengerであるN-acetyl cysteineおよびglutathione ethyl esterの存在下では、ROS産生、ERストレス負荷、殺細胞増強効果の全てがほぼ完全にキャンセルされた。また、de novoタンパク質合成を抑制するシクロヘキサミドを同時添加すると、2剤併用によるERストレス、ROS産生、および殺細胞増強効果は全て抑制された。以上より、両薬剤併用において、翻訳に伴う小胞体内のROS産生亢進とERストレス負荷が相互に連関して、強力な癌細胞死を誘導していると考えられる。

Refractory breast cancer treatment を purpose として, breast cancer cell line MDA - MB231, MDA - MB468, SKBR3 に, ヒストンア off セチル phenoloxidase (HDAC) inhibitor against tonic であるリコリノスタット (RCS) (HDAC6 にす seaborne る sentaku が high い) と, プロテアソーム resistance against tonic ボルテゾミブ (B TZ)を and add た at the same time. The results of そそ and the addition of で単 to the whole cell line by と compared the な cytotoxic enhancement effect of <s:1> て and 乗. Youdaoplaceholder6 confirmed めた. The specific anti-harm test TubacinとBTZと <e:1> is used in conjunction with でとに観 to observe された. Annexin V positive/negative PI cells appear のならびに caspase 3 の activeness が weak いことから, classical アポトーシス経 road を interface さない induced cell death が in stopping された. また, ERAI XBP1 - Venus プローブを with いた small cell body (ER) ストレス経 quantitative analytical method of でも, struck 薬 tonic and で顕 the にストレス load が raised large し, それに with う cell death の raised strong と ER の puffed も観 examine された. <s:1> <s:1> ER <e:1> expansion, transmissive electron 顕 microscope による観 examination におててて confirmation された. ERストレス load を shows that すタ <e:1> パパ in the GRP78, p-PERK, p-eIF2α of the GRS present a <s:1> increase in <s:1> てたたた. RCS と BTZ の and により ROS produced が顕 through にしたが, ミトコンドリアに origin しない ROS produced が MitoSOX parsing から shown された. さらに, ROS の scavenger である N - acetyl cysteine および glutathione baton rouge ester の presence では, ROS generation, ER ストレス load, kill cells raised strong working fruit のてがほぼ completely にキャンセルされた. また, DE novo タンパク quality synthetic を inhibit するシクロヘキサミドを also add すると, 2 tonic and による ER ストレス, ROS generation, および kill cells raised strong working fruit はて suppress all された. Above より, struck 薬 tonic and において, double 訳に with small cell body のう ROS produced hyperthyroidism と ER ストレス load がに each other even masato して, powerful な induced cancer cell death をしていると exam えられる.