ミオシン6のミスセンス変異ヘテロ型で生じる進行性難聴の遺伝子治療

難聴発症原因遺伝子の1つであるミオシン6は、変異アレルホモで先天性難聴および変異アレルヘテロで進行性難聴を発症する。我々はミオシン6に突然変異を持つモデルマウスのヘテロ接合体が患者同様に進行性難聴を生じ、変異アレル間で発症時期が異なることを見出し、ミスセンス変異ヘテロ個体が早発の進行性難聴を引き起こすことも明らかとした。本年度は、アデノ随伴ウイルスベクターを介した遺伝子治療のための基礎データを蓄積するため、以下の項目を実施した。・モデルマウスの表現型解析対象としたモデルマウスの1つであるミオシン6ミスセンス変異マウスは、難聴発症に加え、行動パターンが野生型と異なることが報告されている。さらに、生後初期のヘテロ個体の遺伝子治療により、難聴発症が遅延することも報告された。しかしながら、行動パターンに関する詳細な情報は乏しい状態にある。加えて遺伝子治療によって行動パターンを野生型化できる可能性が推察されたため、オープンフィールドテストを実施した。その結果、ミオシン6ミスセンス変異マウスは欠失変異マウスで認められる旋回行動は認められないものの、行動量増加の可能性を示唆するデータが得られ、現在はヘテロ個体も含めたデータを蓄積している。・アデノ随伴ウイルスベクター構築および導入時期の検討アデノ随伴ウイルスベクター導入により変異アレルの破壊が可能であることが報告され、本研究で有用と考えられるいくつかのアデノ随伴ウイルスベクターを選出している。また、モデルマウスの聴力レベルの低下時期および有毛細胞の不動毛形態異常の出現時期から、その治療時期を検討した。これら知見に行動解析データを加え、蝸牛および前庭の有毛細胞を標的としたミオシン6変異アレル破壊および遺伝子発現の補完を目指したアデノ随伴ウイルスベクター構築の準備を進めている。

難聴発症原因遺伝子の1つであるミオシン6は、変異アレルホモで先天性難聴および変異アレルヘテロで進行性難聴を発症する。我々はミオシン6に突然変異を持つモデルマウスのヘテロ接合体が患者同様に進行性難聴を生じ、変異アレル間で発症時期が異なることを見出し、ミスセンス変異ヘテロ個体が早発の進行性難聴を引き起こすことも明らかとした。本年度は、アデノ随伴ウイルスベクターを介した遺伝子治療のための基礎データを蓄積するため、以下の項目を実施した。・モデルマウスの表現型解析対象としたモデルマウスの1つであるミオシン6ミスセンス変異マウスは、難聴発症に加え、行動パターンが野生型と異なることが報告されている。さらに、生後初期のヘテロ個体の遺伝子治療により、難聴発症が遅延することも報告された。しかしながら、行動パターンに関する詳細な情報は乏しい状態にある。加えて遺伝子治療によって行動パターンを野生型化できる可能性が推察されたため、オープンフィールドテストを実施した。その結果、ミオシン6ミスセンス変異マウスは欠失変異マウスで認められる旋回行動は認められないものの、行動量増加の可能性を示唆するデータが得られ、現在はヘテロ個体も含めたデータを蓄積している。・アデノ随伴ウイルスベクター構築および導入時期の検討アデノ随伴ウイルスベクター導入により変異アレルの破壊が可能であることが報告され、本研究で有用と考えられるいくつかのアデノ随伴ウイルスベクターを選出している。また、モデルマウスの聴力レベルの低下時期および有毛細胞の不動毛形態異常の出現時期から、その治療時期を検討した。これら知見に行動解析データを加え、蝸牛および前庭の有毛細胞を標的としたミオシン6変異アレル破壊および遺伝子発現の補完を目指したアデノ随伴ウイルスベクター構築の準備を進めている。