Development of gene therapy for PTEN abnormal Cowden syndrome using serum-free iPS cells

使用无血清 iPS 细胞开发 PTEN 异常 Cowden 综合征基因治疗

• 批准号: 20K10117
• 负责人: 神田 拓
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K10117/
• 关键词: Cowden症候群; iPS細胞; がん抑制遺伝子; 無血清培養; がん抑制遺伝子PTEN; IPS細胞; 遺伝子治療

全身諸臓器の多発性過誤腫と高率に悪性腫瘍を合併する疾患であるCowden(カウデン)症候群の原因遺伝子はがん抑制遺伝子PTEN(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10)であると報告されている。本研究では本学倫理規定(第ヒ-72号研究課題名:口腔顎顔面領域に病変を有する遺伝子疾患患 者の遺伝子変異およびその遺伝子診断に関する研究)に基づき同意を得られたCowden症候群患者末梢血リンパ球(CS-PBMC)を採取し、PTEN遺伝子の新規変異を検索 した。その結果PTEN遺伝子のヘテロ変異を認め,Codon 341 PhenylalanineのLeucineへ置換,codon 343 Valineのstop codonへの置換を確認した。同定された変異は現在まで報告されていない。また同変異によりPTEN蛋白はcodon342以降のC-末端側が欠損していると考えられた。次に無血清培地hESF9にてヒトES細胞の継代培養，ヒトiPS細胞における未分化性と多分化能を維持可能な無血清培養系にて、センダイウイルスベクターによるCowden疾患特異性iPS細胞誘導を樹立した。次世代シーケンサーにより，PTENのエクソン8における新規生殖細胞変異(c.1020delTおよびc.1026G > A)を検出した.サンガーシークエンスにより、変異型アレルからのPTEN転写物は確認されなかった。健康なPBMCおよびiPSCと比較して、CS由来PBMCおよびCS-iPSCはいずれもPTEN転写産物の発現が有意に低下していた。現在、疾患特異的iPS細胞と健常人由来の細胞をマウス皮下に注入し形成したテラトーマの解析について行なっているが有意さは認められていない。

Multiple organ errors and high incidence of multiple organ tumors combined with disease caused by Cowden syndrome are reported in this paper. This study was conducted in accordance with the ethical requirements of the University (Study No. 72: Study on genetic variation and genetic diagnosis of patients with oral and maxillofacial diseases) and based on the approval of the use of peripheral blood lymphocytes (CS-PBMC) in patients with Cowden syndrome to explore new genetic variation of PTEN. The results show that the PTEN gene has changed dramatically, and the replacement of Codon 341 Phenylalanine with Leucine and the replacement of codon 343 Valine with stop codon have been confirmed. The same is true of the report. The PTEN protein is identical to codon342 and is deficient in the C-terminal side. In addition, the induction of Cowden disease-specific iPS cells was established in serum-free culture lines in which hESF9 cells were cultured and iPS cells maintained their undifferentiated and pluridifferentiated potential. The next generation of PTEN is the new generation of germ cells (c.1020delT> c.1026G > A). The PTEN script is confirmed by the user. Compared with healthy PBMC and CS-iPSC, CS-derived PBMC and CS-iPSC have been found to be significantly lower in PTEN expression. Now, disease-specific iPS cells and healthy human-derived cells are injected subcutaneously to form, analyze and intentionally recognize.

项目成果

当科過去12年間の中顔面骨折の臨床統計的検討

我科12年面中部骨折临床及统计分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 上田結芽;松井健作;神田 拓. 桐山 健.
• 通讯作者: 神田 拓. 桐山 健.

歯根破折および挺出性脱臼を認めた幼若永久歯に対し受傷2ヶ月後に意図的再植を試みた1例

受伤2个月后牙根折断、脱位的年轻恒牙有意再植一例。

• 发表时间: 2020
• 作者: Abe M;Mitani A;Hoshi K;Yanagimoto S.;浅尾友里愛,光畑智恵子,神田 拓,虎谷茂昭,香西克之
• 通讯作者: 浅尾友里愛,光畑智恵子,神田 拓,虎谷茂昭,香西克之

神経線維腫症１型（レッグリングハウゼン病）を有する患者に口腔衛生管理を行った1例

1型神经纤维瘤病（雷格林豪森病）患者口腔卫生管理一例

• 发表时间: 2022
• 作者: 和木田敦子;時数智子;神田 拓;福谷多恵子;尾田友紀;中岡美由紀;岡田芳幸
• 通讯作者: 岡田芳幸

県立広島病院歯科・口腔外科における顎矯正手術の臨床統計的検討

广岛县立医院牙科口腔外科正颌手术的临床统计研究

• 发表时间: 2022
• 作者: 大町香衣;上田結芽;松井健作;神田拓;桐山健
• 通讯作者: 桐山健

上顎骨腫瘍

上颌骨肿瘤

• 发表时间: 2015
• 作者: 隅田賢正;程 クン;丸山 智;船山昭典;小林正治;西山秀昌;林 孝文;朔 敬
• 通讯作者: 朔 敬