薬剤性歯肉増殖症への補完代替療法：ルテインによるTRPA1チャネルの阻害効果

本年度は、ルテインによるフェニトイン性歯肉増殖症の緩和メカニズムの解明を目的として、歯肉組織構成細胞や基質の運命決定機構に着目し、病理組織学的に形態解析した。所定の観察期間の後、上顎試料を摘出し固定液に浸漬させた。その後、実体顕微鏡にて観察し、脱灰パラフィン包埋、第一臼歯の矢状断薄切標本を作製した。切片は、HE染色、マッソントリクローム(MT)染色、免疫蛍光二重染色（TRPA1抗体、S100A4抗体、MMP-1抗体、PCNA抗体）を施した。上顎第一臼歯の頬側歯肉幅を計測した結果、対照群と比較してPHT投与群の歯肉が有意に肥大し、PHT＋LUT投与群の歯肉肥大が有意に軽減していた。HE染色像の観察では、PHT投与群の歯肉が歯槽頂付近まで延伸しており、エオジンに染まる好酸性基質沈着がみられた。また、PHT＋LUT投与群で同様の延伸がみられたが、その程度は軽微であり、基質沈着は対照群と同程度であった。MT染色像では、歯肉中において青色に濃染する膠原線維の面積が、対照群と比較してPHT投与群の面積が有意に増加し、PHT投与群と比較してPHT＋LUT投与群の面積が有意に減少していた。また、TRPA1抗体とS100A4抗体の免疫二重染色では、各群で歯肉結合組織中にTRPA1を発現する歯肉線維芽細胞が確認された。MMP-1 抗体の免疫染色を施した結果、各群における陽性細胞数に有意な差はなかった。細胞増殖活性を観察するためにPCNA 抗体を用いた免疫蛍光染色を施した結果、各群における上皮、結合組織ともに陽性細胞数に有意差はなかった。以上のことから、PHT性歯肉増殖症の発症にTRPA1が関与し、歯肉肥大の病態としてPHT投与による膠原線維の増生促進が起因することが示唆された。また、ルテインがTRPA1チャネル阻害剤として機能することで、PHT性歯肉増殖症の症状緩和に有効であることが示された。

本年度は、ルテインによるフェニトイン性歯肉増殖症の緩和メカニズムの解明を目的として、歯肉組織構成細胞や基質の運命決定機構に着目し、病理組織学的に形態解析した。所定の観察期間の後、上顎試料を摘出し固定液に浸漬させた。その後、実体顕微鏡にて観察し、脱灰パラフィン包埋、第一臼歯の矢状断薄切標本を作製した。切片は、HE染色、マッソントリクローム(MT)染色、免疫蛍光二重染色（TRPA1抗体、S100A4抗体、MMP-1抗体、PCNA抗体）を施した。上顎第一臼歯の頬側歯肉幅を計測した結果、対照群と比較してPHT投与群の歯肉が有意に肥大し、PHT＋LUT投与群の歯肉肥大が有意に軽減していた。HE染色像の観察では、PHT投与群の歯肉が歯槽頂付近まで延伸しており、エオジンに染まる好酸性基質沈着がみられた。また、PHT＋LUT投与群で同様の延伸がみられたが、その程度は軽微であり、基質沈着は対照群と同程度であった。MT染色像では、歯肉中において青色に濃染する膠原線維の面積が、対照群と比較してPHT投与群の面積が有意に増加し、PHT投与群と比較してPHT＋LUT投与群の面積が有意に減少していた。また、TRPA1抗体とS100A4抗体の免疫二重染色では、各群で歯肉結合組織中にTRPA1を発現する歯肉線維芽細胞が確認された。MMP-1 抗体の免疫染色を施した結果、各群における陽性細胞数に有意な差はなかった。細胞増殖活性を観察するためにPCNA 抗体を用いた免疫蛍光染色を施した結果、各群における上皮、結合組織ともに陽性細胞数に有意差はなかった。以上のことから、PHT性歯肉増殖症の発症にTRPA1が関与し、歯肉肥大の病態としてPHT投与による膠原線維の増生促進が起因することが示唆された。また、ルテインがTRPA1チャネル阻害剤として機能することで、PHT性歯肉増殖症の症状緩和に有効であることが示された。