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抗肥満・抗老化機能を担う成体神経幹細胞ニッチの解明

阐明负责抗肥胖和抗衰老功能的成体神经干细胞生态位

基本信息

批准号：
20K11658
负责人：
小谷侑
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Fujita Health University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度までの研究成果により、マウス胚性幹細胞（ES細胞）からタニサイトを含む視床下部様組織（オルガノイド）を分化誘導して培養下で長期間維持する方法を確立した。またこの培養系において、視床下部幹細胞特異的な転写因子であるRaxがタニサイトの幹細胞性の維持に寄与している可能性を見出した。2022年度は、上記オルガノイド内のタニサイトにおけるRaxの発現動態を検討した。Rax遺伝子の一方が緑色蛍光蛋白質（GFP）遺伝子で置換されたヘテロノックインES細胞株（Rax::GFP株）を用いて、内在性のRaxタンパク質とGFPの発現を免疫組織化学的に検討したところ、Raxを発現しないGFP陽性細胞が一部観察され、これらはGFPの発現も弱い傾向が見られた。これらのRax陰性かつGFP弱陽性細胞は、幹細胞性を失い神経細胞等へと分化しつつあるタニサイトであることが示唆された。次に、生体内においてタニサイトの増殖や神経分化を調節することが示唆されているソニックヘッジホッグ（Shh）シグナルに着目した。高濃度のShhシグナル活性化剤を添加してオルガノイドの長期培養を行ったところ、タニサイトの割合が増加するとともに、Rax::GFPの発現が上昇することを見出した。以上の結果より、ShhシグナルはRaxの発現を介してタニサイトの維持に寄与している可能性が示唆された。また、Shhシグナルにより分化が促進される視床下部ペプチド神経について、培養上清中へのペプチド分泌量を測定したところ、タニサイトの発生とともに分泌量の増加が観察されたことから、タニサイトの調節因子として働く可能性が示唆された。

Yesterday's annual までの research により, マウス embryonic stem cells (ES cells) からタニサイトを containing む as bed bottom others organizations (オルガノイド) を induction して cultivate between で long-term under the sustain すしをる method established た. またこの training department において, depending on the bed bottom stem cell specific な planning write factor である Rax がタニサイトの stem cells の maintain に send and しているを likely see a した. The latest developments of <s:1> タニサ and the above record of ガノガノドドドドド Rax in 2022 を検 discuss たた. Rax posthumous son 伝の side が蛍 green light protein (GFP) heritage 伝 son で replacement されたヘテロノックイン ES cell lines (Rax: : GFP strains) をいて, internality の Rax タンパク qualitative と GFP の発 presently を immunohistochemical に beg し検たところ, Rax を発 now しない GFP positive cells が a 観 examine され, <s:1> れらが GFP has a <s:1> weak れら tendency が see られた. これらの Rax negative かつ GFP は weakly positive cells, stem cells sex を lost い god 経へと differentiation しつつあるタニサイトであることが in stopping された. に, born in vivo においてタニサイトの raised colonization や god 経を regulating differentiation することが in stopping されているソニックヘッジホッグ (Shh) シグナルに with mesh した. High concentration の Shh シグナル activeness tonic を add してオルガノイドの long-term training line をったところ, タニサイトの cut close が raised plus するとともに, Rax: : GFP の発 now rising がすることを shows した. の above results より, Shh シグナルは Rax の発を interface now してタニサイトの maintain に send していがる possibility in stopping された. また, Shh シグナルによりが promote differentiation される depending on the lower part of the bed ペプチド god 経について, culture supernatant of へのペプチド secretion を determination したところ, タニサイトの発 raw とともに secretion の raised plus が観 examine されたことから, タニサイトの adjustment factor として働がく possibility in stopping された.