家畜に異常産を引き起こすウイルスの小動物感染モデルの開発

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本研究目的は「家畜に異常産を引き起こすウイルスの小動物感染モデルの開発」である。家畜に異常産を起こすシュマーレンベルグウイルス（SBV）とアカバネウイルス（AKAV）を用いてハムスターモデルを確立する。前年度までに作出した蛍光SBVのin vitroでの性状解析とハムスターへの感染実験を実施した。1. GFP/42-SBV, GFP/38-SBV, GFP/36-SBVと親株のGFP-SBVについてウイルス濃縮を行い、高力価のウイルスを得た。2. 培養細胞における蛍光SBVの性状解析を行なった。全ての組換えウイルスのプラックサイズは野生型（rSBV）より小さかったが、組換えウイルス間であまり差はなかった。GFP/38-SBVとGFP/36-SBVは似たような増殖曲線を描き、GFP/42-SBVはこれら2つのウイルスと比べて力価が低かった。感染細胞において、GFP/42-SBV, GFP/38-SBV, GFP/36-SBVはCPEが起こる前に蛍光を検出でき、時間経過による蛍光発現はGFP/38-SBVが最も早かった。3. 蛍光AKAVを妊娠日齢7日目（n=2）, 8日目（n=1）, 9日目（n=2）, 10日目（n=1）, 11日目（n=1）のシリアンハムスターに皮下投与した。出生子の死亡率は、妊娠9日目投与が80%と最も高く、妊娠7日目と11日目投与では全て生存していた。出生子を実体蛍光顕微鏡で観察した結果、生死に関わらずGFP蛍光は見られなかった。妊娠8日目にウイルス投与した個体を5日目に開腹し胎子を観察したが、蛍光は検出できなかった。4. GFP/38-SBVを妊娠9日目のハムスターに皮下（n=2）および腹腔内投与（n=1）した。皮下投与群では死産は見られず、腹腔内投与では7匹中1匹が奇形を伴う死産、1匹が虚弱子であった。