機械刺激受容によるマクロファージ機能制御とプリン作動性シグナルの役割の検討

通过机械刺激检查嘌呤能信号在巨噬细胞功能调节中的作用

• 批准号: 20K16010
• 负责人: 伊藤 政明
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Takasaki University of Health and Welfare
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K16010/
• 关键词: 機械的進展刺激; マクロファージ; MCP-1; P2Y6受容体; 機械的刺激; プリン作動性シグナル

これまでに、マウス由来培養マクロファージ細胞（RAW264.7細胞）をシリコンチャンバーに播種して進展装置を用いて機械的刺激を負荷すると、細胞外ATP濃度が一過性にかつ進展強度に依存的に上昇し、IL-1β, IL-6, COX-2 およびmonocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1)といった炎症性サイトカイン・ケモカインの遺伝子発現レベルを増加させた。さらに、ヌクレオチド分解酵素のApyrase処理により細胞外ヌクレオチドを消去しても、MCP-1の遺伝子の発現上昇は維持されることを明らかにしてきた。本年度は、マクロファージ細胞の進展刺激による炎症性サイトカイン・ケモカインの遺伝子発現の変化が、増加した細胞外ヌクレオチドに由来する応答であるかを検証した。着目したMCP-1の遺伝子発現は、ATPやADP刺激ではほとんど変化せず、UDP刺激で有意に増加した。マクロファージにはUDPをリガンドとするP2Y6受容体が高発現しており、この受容体は心筋ではリガンド非依存性に機械的刺激を受容する可能性が示唆されている。UDP直接刺激あるいは進展刺激によるMCP-1遺伝子発現およびタンパク質産生の上昇は、P2Y6受容体阻害剤の処理あるいはP2Y6受容体遺伝子をノックダウンすることにより有意に抑制された。また、マクロファージに発現している機械的刺激受容体PIEZO1の遺伝子をノックダウンした場合も進展刺激によるMCP-1遺伝子の発現上昇は抑制された。さらに細胞内のシグナル分子の変化について解析したところ、UDP直接刺激あるいは進展刺激によりERK(extracellular signal-regulated kinase)のリン酸化の亢進が認められ、ERK上流のMEKに対する阻害剤の処理によりこれらの刺激によるMCP-1発現上昇は抑制された。以上のことからマクロファージ細胞の進展刺激により、P2Y6受容体が活性化され、細胞内ではERKの活性化を介してMCP-1の発現が亢進する可能性が示唆された。

Progress of seeding and seeding of これまでに and マウススマクロファージ cells (RAW264.7 cells) The device uses a mechanical stimulus, a load, a transient increase in extracellular ATP concentration, a progression-intensity dependence, and IL-1β, IL-6, COX-2 monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) といったinflammatory サイトカイン・ケモカインの伝子発 appear レベルを Increase plus させた.さらに、ヌクレオチド catalytic enzyme のApyrase treatment により extracellular ヌクレオチドをEliminate it, MCP-1's legacy is rising and maintaining it. This year's progress of は, マクロファージ cells stimulates inflammatory サイトカイン・ケモカインの legacy伝子発appearsの変化が、increased extracellular ヌクレオチドに origin する応answer であるかを検证した. The purpose of MCP-1 is the appearance of the remaining parts, the ATP stimulation is the ADP stimulation, and the UDP stimulation is the intentional expansion.マクロファージにはUDP をリガンドとするP2Y6 recipient が高発 appear しており、このThe receptor's heart muscle is non-dependent and the mechanical stimulus is the possibility of the recipient's tolerance. UDP directly stimulates the development of MCP-1 and stimulates the production of high-quality products, P2Y 6. The object is blocked and treated. P2Y6. The object is blocked and suppressed.また、マクロファージに発appearsしているMechanical stimulation receptor PIEZO1の伝子をノThe progress of ックダウンしたもstimulationによるMCP-1 缝子の発 is now rising and suppressing された.さらにIntracellular のシグナルmolecules の変化についてanalytic したところ, UDP direct stimulation あるいは progress stimulation によりERK (extracellular signal-regulated Kinase), acidification and hyperactivity of ERK, upstream MEK and inhibition of ERK, stimulation and inhibition of MCP-1. The progress of the above-mentioned のことからマクロファージ cells stimulates the activation of the P2Y6 receptor, The possibility of hyperactivation of ERK in cells and the possibility of hyperactivity of MCP-1 are indicated.

项目成果

炎症病態モデルマウスにおける腸間膜動脈の血管機能解

小鼠炎症病理模型肠系膜动脉血管功能分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 尾高椋介;濵口正悟;行方衣由紀;田中光;秋吉玲未乃，伊藤政明，吉田一貴，松岡功
• 通讯作者: 秋吉玲未乃，伊藤政明，吉田一貴，松岡功

ヒト神経膠芽腫A172細胞におけるATPによるインターロイキン６産生亢進作用の解析

人胶质母细胞瘤 A172 细胞中 ATP 诱导白细胞介素 6 产生增强的分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 青木楓佳;伊藤政明;吉田一貴;松岡功
• 通讯作者: 松岡功

P2X4 receptor signaling potentiate Mas-relate G protein-coupled receptor B2-induced mast cell degranulation

P2X4 受体信号传导增强 Mas 相关 G 蛋白偶联受体 B2 诱导的肥大细胞脱颗粒

• 发表时间: 2022
• 作者: 粕谷香;竹澤唯;中川左理;西本哲郎;石井良平;江頭佐都美;橋野陽子;岡本禎晃;大場憲一，島田紘明，橋本凌汰，川瀬篤史，岩城正宏;Kazuki Yoshida，Kousuke Obayashi，Syouta Tanihara，Yuuki Miyashita，Masa-aki Ito，Isao Matsuoka,
• 通讯作者: Kazuki Yoshida，Kousuke Obayashi，Syouta Tanihara，Yuuki Miyashita，Masa-aki Ito，Isao Matsuoka,

Extracellular ATP Augments Antigen-Induced Murine Mast Cell Degranulation and Allergic Responses via P2X4 Receptor Activation

• DOI: 10.4049/jimmunol.1900954
• 发表时间: 2020-06-15
• 期刊: JOURNAL OF IMMUNOLOGY
• 影响因子: 4.4
• 作者: Yoshida, Kazuki;Ito, Masa-aki;Matsuoka, Isao
• 通讯作者: Matsuoka, Isao

Regulation by purinergic signal of glucose-induced insulin secretion from iGL insulinoma cells.

嘌呤能信号对 iGL 胰岛素瘤细胞葡萄糖诱导的胰岛素分泌的调节。

• 发表时间: 2021
• 作者: 道永 昌太郎;粟根 宙生;稲月 直樹;江嵜 愛永;大西 一也;清水かほり;水口 博之;小山 豊;菱沼 滋;Masa-aki Ito，Chinatsu Machida，Kazuki Yoshida，Isao Matsuoka
• 通讯作者: Masa-aki Ito，Chinatsu Machida，Kazuki Yoshida，Isao Matsuoka