がん免疫療法研究に寄与する革新的な肝胆膵がん免疫系ヒト化マウスモデルの開発

开发肝胆癌和胰腺癌免疫系统的创新人源化小鼠模型，为癌症免疫治疗研究做出贡献

• 批准号: 20K17044
• 负责人: 丹尾 幸樹
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K17044/
• 关键词: 肝胆膵がん; がん免疫療法; ヒト化マウス; PDXマウスモデル; iPS細胞; がん免疫; 免疫チェックポイント阻害剤

消化器がんの中で、特に予後不良ながん種である肝胆膵がんは、有効な治療法の開発が求められている。本研究では、肝胆膵がんに対するがん免疫療法の治療効果を正しく評価する事が可能な、同一患者から得られたがん細胞とiPS細胞由来免疫細胞を移植したヒトがん免疫マウスモデル開発を目的としている。これまでに、膵がんではEUS-FNA検体や腹水中の細胞を用いて3つの膵がんPDXモデルを樹立した。そのうち２つは膵がん細胞株化に成功し、これらはマウスへの皮下移植が可能であり、がん免疫マウスモデルに使用可能な細胞と考えられた。さらに、腹水細胞由来とする細胞株は皮下のみならず腹腔内にも生着可能で腹膜播種モデルとしても使用可能な細胞株であった。本年度は、この腹膜播種モデルの基となったがん患者のリンパ球からiPS細胞を樹立した。さらに本年度は、別の膵がん患者リンパ球から樹立したiPS細胞を用い、iPS細胞のマウス骨髄内への移植による生着と血液細胞分化の有無を確認した。まず、樹立した未分化のiPS細胞を、化学的に骨髄機能を抑制した免疫抑制マウスの腓骨髄内に移植した。移植後6週以降、経時的にマウス尾静脈から採血を行い、マウス血中のヒト免疫細胞の有無をフローサイトメトリーで解析したが、残念ながらヒト免疫細胞の存在は確認できなかった。現在、iPS細胞の血液細胞への分化誘導やマウスへの効率的な移植方法について研究を行っている。また、将来のがん免疫モデル作成に必要な肝胆膵がん組織からのPDXマウスの作成、細胞株樹立ならびに同一患者からのリンパ球回収・保存、iPS細胞作製を並行して行っている。

在胃肠道癌中，肝胆胰腺癌是一种预后不良的癌症，尤其需要开发有效的治疗方法。这项研究旨在开发一种人类癌症的小鼠模型，其中植入了癌细胞和IPS细胞衍生的免疫细胞，从而可以正确评估癌症免疫疗法对肝胆汁肝癌的治疗作用。迄今为止，使用EUS-FNA标本和腹水中的细胞建立了三个胰腺癌PDX模型。这些细胞中的两个成功转化为胰腺癌细胞系，这些细胞可以皮下植入小鼠中，并被认为在癌症免疫模型中可用。此外，源自腹水细胞的细胞系不仅可以在皮下，而且可以在腹膜腔中雕刻，并且可以用作腹膜播种模型。今年，IPS细胞是从癌症患者的淋巴细胞中建立的，这是这种腹膜传播模型的基础。此外，今年，我们使用了另一位胰腺癌患者淋巴细胞建立的IPS细胞来确认是否植入了IPS细胞并通过将其移植到小鼠的骨髓中来分化。首先，将已建立的未分化的IPS细胞移植到具有化学抑制骨髓功能的免疫抑制小鼠的腓骨骨髓中。从植入后的6周开始，从尾静脉中收集血液，通过流式细胞仪分析小鼠血液中的人类免疫细胞的存在或不存在，但不幸的是，无法证实人类免疫细胞的存在。目前，我们正在进行有关诱导IPS细胞分化为血细胞的研究，并有效地移植方法到小鼠中。此外，PDX小鼠是由肝胆胰腺癌组织产生的，这对于未来的癌症免疫模型，建立细胞系，收集和储存来自同一患者的淋巴细胞以及并行产生IPS细胞所必需。