尿中落下細胞に含まれる多能性幹細胞の同定と解析

尿液脱落细胞中多能干细胞的鉴定与分析

• 批准号: 20K17272
• 负责人: 内田 奈生
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K17272/
• 关键词: 尿中落下細胞; 多能性幹細胞; SSEA-3; 再生医療; 糸球体再生; 細胞塊; 間葉系幹細胞; 腎臓病

＜尿中落下細胞内の尿幹細胞の同定と尿幹細胞の患者腎組織における局在＞これまでの実験結果から尿幹細胞のマーカーとしてstage specific embryonic antigen 3(SSEA-3)を用いることとした。尿中落下細胞を採取した小児腎臓病患者の診断時腎生検標本の余剰切片を用いて、SSEA-3の免疫染色を行った。非特異的反応を排除するのに難渋し、評価できた検体は4検体にとどまった（Alport症候群3件、うち1件は腎機能低下あり。感染関連糸球体腎炎1件）。尿細管、糸球体、間質に少数の陽性細胞を認めた。Alport症候群の腎機能低下がない時期の検体では、陽性細胞は間質にわずかに存在し、腎機能障害を認めた年長例からの検体では尿細管に陽性細胞を認めた。感染関連糸球体腎炎の急性期の患者では糸球体内に陽性細胞を認める頻度が高かった。いずれも血尿・蛋白尿を来す疾患ながら陽性細胞の分布が異なることは、腎疾患によって炎症を介在するカスケードやそれに対する修復反応の違いがあることを示す可能性がある。今後、検体数を増やして、様々な疾患でのSSEA-3陽性細胞の局在の違いを解析していく。＜尿幹細胞の性質；間葉系組織（骨、軟骨、脂肪）への分化能、多能性の有無＞多能性幹細胞マーカーであるNanog、Oct3/4について、尿中落下細胞と皮膚線維芽細胞からRNAを採取し、ｑPCRを施行した。これはサンプルの不良により結果が得られなかった。

<根据先前的实验结果，尿液中掉落细胞中尿干细胞的尿液细胞和尿干细胞的定位，特定于阶段的特定胚胎抗原3（SSEA-3）用作尿干细胞的标记。 SSEA-3的免疫染色是在诊断出掉落在尿液中收集的细胞的小儿肾脏疾病患者时，使用肾脏活检标本的过多切片进行。很难消除非特异性反应，并且仅评估了四个标本（3例ALPORN综合征，其中一种患有肾功能受损；一例与感染相关的肾小球肾炎）。在小管，肾小球和基质中发现了少数阳性细胞。在由于Alport综合征引起的肾功能没有降低的标本中，基质中只有少数阳性细胞，以及来自肾功能不全的老年患者的标本，肾小管中的阳性细胞。在感染相关的肾小球肾炎的急性阶段，肾小球中的阳性细胞在患者中更为常见。尽管两种疾病都会引起血尿和蛋白尿，但阳性细胞的不同分布可能表明，炎症和修复反应介导的级联反应存在差异。将来，我们将增加标本的数量，并分析各种疾病中SSEA-3阳性细胞定位的差异。 <尿干细胞的材料：分化对间充质组织（骨骼，软骨，脂肪）的能力，以及它们是否具有多能性干细胞标记Nanog和Oct3/4的多能，RNA是从尿液和皮肤成纤维细胞中掉落的细胞中收集的，并且进行了QPCR。由于样本差而无法获得此结果。