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ヒルシュスプルング病有神経節腸管における神経及び免疫細胞の相互発生制御機構の検証

先天性巨结肠神经节状肠道神经与免疫细胞发育相互调控机制的验证

基本信息

批准号：
20K17593
负责人：
武田昌寛
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Juntendo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

1．腸管免疫系、神経系の発生過程における形態学的観察初年度及び次年度で確立した腸管組織透明化による三次元イメージング法、特にパイエル板の透明化ホールマウント検体を用い、ヒルシュスプルング病（H病）モデルマウスにおける腸管神経系及び免疫系の経時的な発生過程の検証を行った。高解像度レーザー顕微鏡を用い、出生7日のコントロールマウスにおけるパイエル板内におけるPSA-NCAM（未熟神経マーカー）陽性の微細な神経線維の観察に成功した。しかしパイエル板内におけるTuj1（成熟神経マーカー）陽性の神経線維の観察が困難であったこと、またH病モデルマウスにおけるパイエル板はコントロールマウスのそれよりも更に小さく、再現性のある神経線維の観察も困難であったことより、パイエル板における神経線維と免疫細胞の発生過程における相互関係を形態学的に観察することは困難であると結論付けた。H病難治性腸炎において、腸管免疫応答の活性化に重要な役割をもつとされるM細胞に着目して上記三次元イメージング解析でコントロールマウスとH病モデルマウスの比較検証を行うことを試みた。出生24日のマウスを使用しGP２（成熟M細胞マーカー）及びSpiBによる免疫染色を施行。切片における評価ではH病モデルマウスのGP2陽性M細胞が少ない傾向であった。しかし三次元イメージングにより濾胞随伴上皮層におけるM細胞の観察を試みるも、コントロールマウス、H病モデルマウスともに極僅かの細胞しか観察されず、また再現性の確立も困難であった。

1． Observation of the morphological process of the intestinal immune system and the nervous system in the first year and the next year established the three-dimensional method for transparency of intestinal tissue and the special にパイエル Board method Transparent ホールマウント検体を用い, ヒルシュスプルング Disease (H disease) モデルThe pathogenesis of the development of the intestinal nervous system and the immune system during the disease process. High-resolution micro-mirror camera, 7-day-old のコントロールマウスにおけるパイエルItauchiおけるPSA-NCAM (Unripe God 経マーカー) Positive のMicro な神経线dimensional の観看に Success した.しかしパイエル within the board におけるTuj1 (Mature god 経マーカー) positive の神経线dimensional の観Observation がdifficulty であったこと、またH diseaseモデルマウスにおけるパイEruban board Small さく, reproducibility of the のある神経线dimensional の観看もdifficulty であったことより, パイエル板における神経线dimensional The development process of immune cells and the interrelationships are difficult and the conclusions are drawn based on the morphological examination. H-disease refractory enteritis, the importance of activation of intestinal immune responses, the importance of sterilization, and the focus of M cells Three-dimensional イメージングanalytics でコントロールマウスとH disease モデルマウスの comparison 検证を行うことをtrial みた. Immunostaining was performed on the 24th day of life using GP2 (mature M cell malaccharin) and SpiB immunostaining. Section analysis and evaluation of H-pathogen-positive GP2-positive M cells have a tendency to cause less disease.しかし三dimensional イメージングにより filter cell with epithelial layer におけるM cell の観看をtrial みるも、コントロールMashiko, H-disease モデルマウスともに extremely only かのcell しか観看されず, またestablishing reproducibility is difficult であった.

项目成果

期刊论文数量（2）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Biopsy diagnosis of Hirschsprung’s Disease using a single excisional biopsy based on the anorectal line.

使用基于肛门直肠线的单次切除活检对先天性巨结肠进行活检诊断。

DOI：
10.1055/a-2065-9071
发表时间：
2023
期刊：
European Journal of Pediatric Surgery
影响因子：
1.8
作者：
Takeda Masahiro;Ochi Takanori;Koga Hiroyuki;Tsuboi Koichi;Arakawa Atsushi;Lane Geoffrey J;Yamataka Atsuyuki
通讯作者：
Yamataka Atsuyuki

Anorectal lineを基準とした直腸粘膜生検(単一検体)によるHirschsprung病診断の有用性の検証

基于肛门直肠线的直肠粘膜活检（单个标本）验证先天性巨结肠诊断的有效性