神経障害性疼痛発症メカニズムにおけるミクログリアCRACチャネルの重要性

小胶质细胞 CRAC 通道在神经病理性疼痛发生机制中的重要性

• 批准号: 20K17844
• 负责人: 辻川 翔吾
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka Metropolitan University (2022)Osaka City University (2020-2021)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K17844/
• 关键词: 神経障害性疼痛; ミクログリア; CRAC; カルシウム

これまでにCre-loxPシステムによりミクログリア特異的にCRACチャネルをノックアウトしたコンディショナルノックアウトマウス（CX3CR1 ERT2、orai1 fl/fl）を作成した。行動学実験からミクログリアCRACチャネルが神経障害性疼痛発症に関与している可能性が示唆され、カルシウムイメージングから得られた結果からミクログリアCRACチャネルによるカルシウムシグナルが機序として考えられた。さらに、野生型およびノックアウトマウスの脛骨神経および総腓骨を結紮したアロディニアモデルマウスを作成し7日後の腰髄を摘出し炎症性サイトカインの濃度をELISAh法で測定した。IL-6、IL-1B、TNFa、BDNFいずれも野生型モデルマウスではコントロール群と比較し腰髄での濃度が有意に上昇していたが、ノックアウトマウスの腰髄組織では濃度上昇が有意に抑制された。また過去の報告から炎症性サイトカインは脊髄に作用し興奮性シグナルを増幅することで中枢神経に痛みの情報を伝達することが知られている。そこでアロディニアモデルマウス作成7日後に急性脊髄スライスを作成しパッチクランプ法でspontaneous excitatory/inhibitory postsynaptic current (sI/EPSC)の記録を行った。野生型マウスの脊髄ではsEPSCのfrequencyがコントロール群と比較し有意に増加していたが、ノックアウトマウス由来の脊髄ではsEPSCのfrequency増加が有意に抑制された。sIPSCについては両群で有意な差は認めなかった。このことからノックアウトマウスでは抑制性シグナルには影響を与えず、興奮性シグナルのみが抑制されることでアロディニア症状が軽減している可能性が示唆された。

こ れ ま で に Cre - loxP シ ス テ ム に よ り ミ ク ロ グ リ ア specific に CRAC チ ャ ネ ル を ノ ッ ク ア ウ ト し た コ ン デ ィ シ ョ ナ ル ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス (CX3CR1 ERT2, orai1 fl/fl) を made し た. Action learning be 験 か ら ミ ク ロ グ リ ア CRAC チ ャ ネ ル が god 発 経 handicap of sexual pain disorder に masato and し て い が る possibility in stopping さ れ, カ ル シ ウ ム イ メ ー ジ ン グ か ら have ら れ た results か ら ミ ク ロ グ リ ア CRAC チ ャ ネ ル に よ る カ ル シ ウ ム シ グ ナ ル が machine sequence と し て exam え ら れ た. さ ら に, wild type お よ び ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の tibial god 経 お よ び 総 fibula を ligation し た ア ロ デ ィ ニ ア モ デ ル マ ウ ス を made し 7 later の waist marrow を pick the し inflammatory サ イ ト カ イ ン の concentration を ELISAh で method to determine the し た. IL - 6, IL - 1 b, TNFa, BDNF い ず れ も wild-type モ デ ル マ ウ ス で は コ ン ト ロ ー ル group と compare し waist marrow で の concentration rising が intentionally に し て い た が, ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の waist marrow tissue で は concentration rise が intentionally に restrain さ れ た. ま た past の report か ら inflammatory サ イ ト カ イ ン は spinal marrow に role し excitatory シ グ ナ ル を rights of す る こ と で central god 経 に pain み の intelligence を 伝 da す る こ と が know ら れ て い る. そ こ で ア ロ デ ィ ニ ア モ デ ル マ ウ ス done after 7 に acute spinal marrow ス ラ イ ス を made し パ ッ チ ク ラ ン プ method で what excitatory/inhibitory postsynaptic current (sI/EPSC) line の record を っ た. Wild-type マ ウ ス の spinal marrow で は sEPSC の frequency が コ ン ト ロ ー ル group と compare し intentionally に raised plus し て い た が, ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス origin の spinal marrow で は sEPSC の frequency raised が requirement by deliberately に inhibit さ れ た. sIPSCに に に に て て て て the two groups で intentional な difference て recognition めな った った った. こ の こ と か ら ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス で は inhibitory シ グ ナ ル に は influence を and え ず, excitatory シ グ ナ ル の み が inhibit さ れ る こ と で ア ロ デ ィ ニ ア symptoms が 軽 minus し て い が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

神経障害性疼痛メカニズムにおけるミクログリアCRACチャネルの重要性

小胶质细胞 CRAC 通道在神经病理性疼痛机制中的重要性

• 发表时间: 2022
• 作者: Hiroshi Araki;Motohiro Sekino;Naoya Iwasaki;Miki Suzumura;Takashi Egashira;Rintaro Yano;Sojiro Matsumoto;Ushio Higashijima;Takashi Sugimoto;Hirotomo Yamanashi;Tetsuya Hara;辻川 翔吾
• 通讯作者: 辻川 翔吾