軟骨再生での間葉系幹細胞の増殖機序の解明と増殖を制御する関節内完結型治療法の発案

阐明间充质干细胞在软骨再生中的增殖机制并开发控制增殖的关节内治疗方法

• 批准号: 20K18055
• 负责人: 日山 鐘浩
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18055/
• 关键词: 軟骨; 機序の解明; 間葉系幹細胞; 細胞分裂; 軟骨再生; 増殖機序; 関節内完結型治療法

ラットに対して、モノヨード酢酸ナトリウムを用いて、炎症誘導時に滑膜内のMSCsが炎症誘導因子投薬後1から4日目に強い分裂、増殖する事を見出した。そこで、今回、ラット（Wistar rat，雄，8週齢）の膝に低用量（0.2mg）のモノヨード酢酸ナトリウムを膝関節内ん投与して、炎症を惹起し細胞分裂をのモデルを作成する事とした。更に分裂時にDNA に取り込まれる、チミジン・アナログ蛍光染色剤のClduを炎症誘発後1、2日目に投与し、続いてIduを炎症誘発後3，4日目に投与し、細胞分裂を時系列的に評価した。1，2日目に表層の細胞が分裂し、その分裂した細胞のうち表層に近い細胞が3，4日目にも連続して分裂する事を見出した。表層にある細胞が一部はその場にとどまり分裂を繰り返し、一部は深層に移動していた。一方で深層に存在した、或いは深層に移動してきた細胞は分裂が弱かった。そして、滑膜MSCsは表層にある場合のみ強く分裂していることが分かった。つまり、MSCsの細胞分裂が繰り返す際には細胞因子と環境因子が組み合さって選択されていることが示唆された。なお、上記結果に対して、ClduとIduの投与順を逆さにし、相互作用が無い事の確認を行ったが同様の結果が得られた。また、炎症反応前にClduとIduを投与することにより今まで分かっていなかった、ClduとIduの膝内での活性期間を明らかにした。上記により得られている増殖パターンの確からしいを確認された。その後分裂にてチミジン・アナログ蛍光染色剤のClduを吸収した細胞のフローサイトメトリーを用いた、ソーティング解析を試みたが、チミジン・アナログ蛍光染色剤の発色の為の抗体により細胞破壊が強く、フローサイトメトリーによるソーティング後にリアルタイムPCRを行ったところ、cDNAの十分なクオリティを達成する事は出来なかった。

ラ ッ ト に し seaborne て, モ ノ ヨ ー ド boggy acid ナ ト リ ウ ム を with い て, inflammation induced within the に synovial の MSCs が inflammation induced factor 1 after he 薬 か ら 4 strong に い division, raised colonization す る matter を show the し た. そ こ で, today back, ラ ッ ト (Wistar rat, male, 8 weeks 齢) の knee に low dosage (0.2 mg) の モ ノ ヨ ー ド boggy acid ナ ト リ ウ ム を knee masato ん shot within section and し て, inflammation を provoked し cell division を の モ デ ル を made す る matter と し た. Split more に に DNA に take り 込 ま れ る, チ ミ ジ ン · ア ナ ロ グ 蛍 light staining tonic の Cldu を inflammation induced 発 after 1, 2 eyes cast with し に, 続 い て Idu を inflammation induced 発 に cast with し, 3, 4 days after cell division を series of に review 価 し た. Surface layer 1, 2, item に が の cell divides し, そ の split し た cells の う ち surface に が い cells 3, 4 days of item に も even 続 し て split す る matter を show the し た. Surface に あ る cells が a は そ の field に と ど ま り split を Qiao り return し, a deep は に mobile し て い た. There is a <s:1> た in the deep で of one party, or there is a に in the deep に of the に mobile <s:1> て た た た た た cells <s:1> divide が weakly った った. そ し て, synovial MSCs は surface に あ る occasions の み strong く split し て い る こ と が points か っ た. つ ま り, MSCs の cell division が Qiao り return す interstate に は cytokines と environmental factor が group み さ っ て sentaku さ れ て い る こ と が in stopping さ れ た. な お, written results に し seaborne て, Cldu と Idu の cast with direct を reverse さ に し interaction, there is nothing い が の confirm line を っ た が with others の results ら が れ た. ま た, inflammation, the former 応 に Cldu と Idu を cast with す る こ と に よ り today ま で points か っ て い な か っ た, Cldu と Idu の inside knee で の activity during を Ming ら か に し た. The above is recorded as によ and によ, which gives られて and る, which increase パタ and る, which confirms ら and を. そ の split after に て チ ミ ジ ン · ア ナ ロ グ 蛍 light staining tonic の Cldu を suction 収 し た cells の フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー を with い た, ソ ー テ ィ ン グ parsing を try み た が, チ ミ ジ ン · ア ナ ロ グ 蛍 light staining tonic の 発 color の is の antibody に よ り cells broken 壊 が く, フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー に よ る ソ ー テ ィ ン グ after に リ ア ル Line タ イ ム PCR を っ た と こ ろ, cDNA の is な ク オ リ テ ィ を reached す は る things な か っ た.

项目成果

ラット膝関節炎モデルにおいて増殖した滑膜細胞は軟骨表面に移動する－関節内組織幹細胞の探求－

大鼠膝关节炎模型中增殖的滑膜细胞迁移至软骨表面 - 关节内组织干细胞的探索 -

• 发表时间: 2021
• 作者: 吉原 有俊;片桐 洋樹;中川 裕介;日山 鐘浩;宮武 和正;中村 智祐;辻 邦和;関矢 一郎;大川 淳;古賀 英之
• 通讯作者: 古賀 英之

リバース型人工肩関節再置換術を施行した解剖学的人工関節置換術後・後方脱臼の1例

反式肩关节置换术后后脱位一例

• 发表时间: 2022
• 期刊: 肩関節
• 作者: 石黒 啓輝;石畑 知沙;日山 鐘浩;松山 嘉彦;望月 智之
• 通讯作者: 望月 智之

Augmented baseplate を用いたRSA を施行した高齢者の前方脱臼による関節窩骨折例の短期成績

使用增强基板进行 RSA 治疗的老年患者因前脱位导致的关节盂骨折的短期结果

• 发表时间: 2022
• 期刊: 肩関節
• 作者: 日山 鐘浩;望月 智之
• 通讯作者: 望月 智之

Effects of different surgical procedures for meniscus injury on two-year clinical and radiological outcomes after anterior cruciate ligament reconstructions. -TMDU MAKS study

半月板损伤的不同手术方法对前十字韧带重建后两年临床和放射学结果的影响。

• DOI: 10.1016/j.jos.2020.12.010
• 发表时间: 2021
• 期刊: Journal of Orthopaedic Science
• 影响因子: 1.7
• 作者: Hoshino Takashi;Nakagawa Yusuke;Inomata Kei;Ohara Toshiyuki;Katagiri Hiroki;Otabe Koji;Ueki Hiroko;Hayashi Masaya;Nagase Tsuyoshi;Sekiya Ichiro;Ogiuchi Takashi;Muneta Takeshi;Koga Hideyuki;Hoshino Akiho;Yoshimura Hideya;Mochizuki Tomoyuki
• 通讯作者: Mochizuki Tomoyuki