ナノスーツ法を用いた血中循環HPV感染細胞のリアルタイムモニタリング法の確立

纳米服法实时监测循环HPV感染细胞方法的建立

基本信息

批准号：
20K18249
负责人：
喜夛淳哉
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Hamamatsu University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ナノスーツ法は短時間で簡便に電界放出型走査型電子顕微鏡で立体構造が保たれたまま高倍率・高分解能で観察できる革新的な技術である。循環腫瘍細胞(Circulating Tumor Cells: CTC)は、血液腫瘍マーカーよりも病勢や治療効果を反映する可能性が示唆されており注目されている。CTCをナノスーツ法で観察する新手法を確立し、HPVに感染したCTCを微細構造が保たれた状態で観察及びリアルタイムでモニタリングを行うことで、HPV陽性中咽頭癌の病勢や予後判定を行うことや早期癌スクリーニングへの応用も目指す。HPV粒子観察技術の確立を目的とし、HPVタイプ6又はタイプ11が陽性となった喉頭乳頭腫を用い検討を行った。免疫染色でHPV-L1(カプシド蛋白)陽性部位において、ナノスーツ法で観察すると約50nmの微小粒子を核内に多数認めた。透過型電子顕微鏡を用いて同一部位を観察(戻し電顕法)においても約50nmの微小粒子を多数認めた。これらからHPV粒子が観察されたものと判断した。さらにHPV粒子が観察される喉頭乳頭腫は予後不良な症例が多いことが明らかとなり、論文報告を行った。しかし、現状では培養細胞を用いたCTCを模倣したモデルによりHPV粒子の同定を試みているが、有望な結果は得られていない。一方で、一部ではHPV陽性中咽頭癌が関与されるとする原発不明癌症例のCell free DNA解析において、HPV-DNA解析が有用な新規バイオマーカーとなる可能性が判明した。本知見のCTCへの応用は可能か、CTCでのHPV粒子観察の検討に加え、解析中である。

纳米服是一种创新的技术，可以在短时间内使用现场发射扫描电子显微镜来保持高放大倍率和高分辨率的易于观察。已经提出，循环肿瘤细胞（CTC）比血液学肿瘤标记更反映疾病和治疗功效，并且引起人们的注意。已经建立了一种使用纳米服方法观察CTC的新方法，并通过观察和监测HPV感染的CTC，以保持其微观结构的维护，并实时实时确定HPV阳性阳性型核咽癌的疾病和预后，并将其应用于早期的癌症筛查。为了建立HPV颗粒观测技术，使用了喉头含量为6型6或11型，喉头膜瘤进行了研究。当通过纳米插入法观察时，通过免疫染色，在HPV-L1（衣壳蛋白）阳性位点在核中观察到大量约50 nm的微粒。当使用透射电子显微镜（返回电子显微镜）观察到同一区域时，还观察到许多大约50 nm的微粒。从这些结果可以确定已经观察到HPV颗粒。此外，据透露，观察到HPV颗粒的喉头乳杆菌病例，预后较差，并且报道了该论文。但是，尽管目前使用模拟CTC使用培养细胞来识别HPV颗粒，但尚未获得有希望的结果。另一方面，已经发现HPV-DNA分析可能是未知原发性癌症细胞无细胞DNA分析的一种有用的新型生物标志物，在某些情况下，HPV阳性口咽癌涉及HPV阳性口咽癌。这种发现可能应用于CTC吗？除了检查CTC中的HPV颗粒观测值外，我们目前正在进行分析。

项目成果

期刊论文数量（29）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

G Protein-Coupled Receptor Genes, PTGDR1, PTGDR2, and PTGIR, Are Candidate Epigenetic Biomarkers and Predictors for Treated Patients with HPV-Associated Oropharyngeal Cancer.

G蛋白偶联受体基因PTGDR1、PTGDR2和PTGIR是HPV相关口咽癌患者的候选表观遗传生物标记物和预测因子

DOI：
10.3390/microorganisms8101504
发表时间：
2020-09-29
期刊：
Microorganisms
影响因子：
4.5
作者：
Misawa K;Imai A;Kanazawa T;Mima M;Yamada S;Mochizuki D;Yamada T;Shinmura D;Ishikawa R;Kita J;Yamaguchi Y;Misawa Y;Mineta H
通讯作者：
Mineta H

耳管内に進展する上咽頭アミロイドーシスの１例

鼻咽部淀粉样变性延伸至咽鼓管1例

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
Ishikawa Ryuji;Imai Atsushi;Mima Masato;Yamada Satoshi;Takeuchi Kazutaka;Mochizuki Daiki;Shinmura Daichi;Kita Jun-ya;Nakagawa Takuya;Kurokawa Tomoya;Misawa Yuki;Nakanishi Hiroshi;Takizawa Yoshinori;Misawa Kiyoshi;喜夛淳哉，中西啓，細川久美子，細川誠二，峯田周幸
通讯作者：
喜夛淳哉，中西啓，細川久美子，細川誠二，峯田周幸

Eight Cases of Spindle Cell Carcinoma Arising in the Head and Neck Region

头颈部梭形细胞癌8例

DOI：
10.5631/jibirinsuppl.156.61
发表时间：
2021
期刊：
Practica oto-rhino-laryngologica. Suppl.
影响因子：
0
作者：
Yamaguchi Yuki;Hosokawa Seiji;Kita Junya;Mochizuki Daiki;Imai Atushi;Takizawa Yoshinori;Misawa Kiyoshi;Mineta Hiroyuki
通讯作者：
Mineta Hiroyuki

外耳道狭窄により発見が遅れた先天性真珠腫例

因外耳道狭窄导致晚期先天性胆脂瘤一例