p27kips1の成体ミュラー細胞における転写制御機構の解析

成年Muller细胞中p27kips1转录调控机制分析

基本信息

批准号：
20K18361
负责人：
須藤則広
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Toho University (2021-2022)Tokyo Women's Medical University (2020)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18361/
关键词：
網膜発生転写制御網膜 p27 ミュラー細胞網膜発生・再生 p２７

项目摘要

p27Kip1（以下、p27）遺伝子は、細胞周期制御因子として細胞が細胞周期から離脱することを制御している。しかし近年は細胞周期制御因子としての機能以外に転写制御因子としての可能性についても注目が集まっている。本研究では網膜のグリアであるミュラー細胞のp27遺伝子の機能について解析を行っている。発生期の網膜前駆細胞でp27遺伝子が発現すると増殖が停止し、その後神経分化へと進む。成熟した網膜の神経細胞ではp27遺伝子の発現は減少するが、なぜかミュラー細胞においては強く維持されている。現在までにその機能は明らかではなく本研究において転写制御因子としての可能性を追求している。昨年度p27遺伝子ノックアウトマウスと野生型マウスを用いて網膜におけるRNAシークエンス解析を行い、網羅的な遺伝子変動について調べたが、本件度はさらにゲノムや解析法を変えて再解析を行った。さらにミュラー細胞に対するp27遺伝子のクロマチン免疫沈降シークエンス解析も合わせて進行中である。網膜を用いたRNAシークエンスの再解析では前回の解析同様に発現が上昇する遺伝子が多くみられた。またp27遺伝子ノックアウトマウスの網膜では外境界膜が壊れる形態的特徴が知られているが、これと関連し細胞を密接に繋ぐタイトジャンクション遺伝子が大きく減少している可能性が示された。さらにp27遺伝子ノックアウトマウスの網膜では錐体細胞が減少していることが報告されているが、RNAシークエンスでも同様の結果が得られた。錐体細胞変性に伴う、炎症応答・保護作用に関連した多くの遺伝子の上昇が確認された。p27遺伝子ノックアウトマウスの網膜では他の網膜変性マウスと同様に視細胞の保護作用が働いていると考えられる。従ってp27遺伝子ノックアウトマウスが新たな遺伝的な網膜変性マウスである可能性を示すものであるといえる。

p27KIP1（以下简称p27）基因控制细胞从细胞周期中作为细胞周期调节剂的撤离。但是，近年来，除了作为细胞周期调节剂的功能外，注意力集中在其作为转录调节器的潜力上。这项研究分析了p27基因在视网膜的神经膜中的p27基因的功能。当p27基因在新生的视网膜祖细胞中表达时，停止增殖并随后发展为神经分化。在成熟的视网膜细胞中，神经元中p27基因的表达降低，但由于某种原因，它在muller细胞中得到了强烈的维持。迄今为止，其功能尚不清楚，在这项研究中，它一直在追求其作为转录调节器的潜力。去年，使用p27基因敲除小鼠和野生型小鼠在视网膜中进行了RNA测序，并研究了全面的遗传变化，但是上述重新分析是使用不同的基因组和分析方法进行的。此外，还正在进行p27基因对穆勒细胞的染色质免疫沉淀测序分析。在使用视网膜的RNA序列重新分析中，发现许多基因的表达增加，类似于先前的分析。此外，已知P27-Gene基因敲除小鼠视网膜外边界膜分解的形态特征，但已显示出紧密连接细胞的紧密连接基因显着降低。此外，据报道，p27基因敲除小鼠的视网膜中锥细胞的数量减少，但通过RNA测序获得了相似的结果。已经证实了许多与炎症反应和锥体变性相关的保护作用相关的基因。据认为，p27基因敲除小鼠的视网膜与其他视网膜退行性小鼠相同的方式可保护感光细胞。因此，可以说p27基因敲除小鼠可能是新的遗传变性小鼠。