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サイトメガロウイルスのマウス眼における線維柱帯構造変化

巨细胞病毒引起的小鼠眼小梁结构变化

基本信息

批准号：
20K18375
负责人：
清水大輔
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒトサイトメガロウイルス(HCMV)はヒト角膜内皮に感染し角膜内皮炎を引き起こし同時に眼圧の上昇を伴うことが多く、続発性の緑内障をきたし不可逆性な視機能低下を引き起こす原因となっているが、眼圧上昇の機序は未だ定かになっておらず、機序を明らかにするため、我々は過去に、HCMVがヒト線維柱帯細胞にも感染することで、線維柱帯の構造変化が起こり、房水流出抵抗が上がることで眼圧が上昇していると仮説を立て、実際に複数のHCMV株がヒト線維柱帯細胞に感染することを証明し、細胞構造変化に関与するいくつかのサイトカインの上昇を示すことができた。しかしin vivoにおいてHCMVが眼圧上昇を惹起することは未だ示されておらず、本研究では複数のCMV株を動物モデルにおいて角膜内皮炎を惹起させ、線維柱帯組織の変化について検証することで、HCMV感染による眼圧上昇の原因の解明を行う予定である。予定ではラットに対するCMV角膜内皮炎モデルの作成を当初行う予定であり、その後の評価を行う予定であったが、取り扱いの簡便さや標本の取り扱いやすさを考慮し、マウスを用いてのCMV角膜内皮炎モデルを作成し、その後、線維柱帯組織の評価（CMV角膜内皮炎を発症したラットから眼球を摘出し線維柱帯組織フラットマウントを作製しCMV感染をIE1、gB、pp65、UL44などの抗体を用いた蛍光顕微鏡での確認や、電子顕微鏡でのowl’s eye様変化やウイルス粒子などの有無の確認）を行えるよう準備を整えている。

Corneal endothelitis (HCMV) causes corneal endothelitis and eye pressure rise, accompanied by multiple, progressive cataracts and irreversible vision loss. The cause of eye pressure rise is uncertain, and the mechanism of HCMV infection is unclear. The structure of the column is changed, the outflow resistance of aqueous humor is increased, the eye pressure is increased, and the infection of a plurality of HCMV strains in the column cells is proved. The structure of the cell is changed, and the increase of the aqueous humor outflow resistance is indicated. The cause of HCMV elevated ocular pressure in vivo was not shown. In this study, the cause of corneal endothelitis in multiple CMV strains was investigated. The cause of HCMV elevated ocular pressure in vivo was identified. Predetermined CMV corneal endothelitis preparation, pre-determined evaluation, pre-determined evaluation, pre (CMV corneal endothelitis development, eye extraction, column tissue extraction, control, CMV infection, IE1, gB, pp65, UL44, antibodies, light microscopy, electron microscopy, owl's eye detection, particle detection, presence/absence confirmation)