口腔粘膜における光受容機序を探る～光受容タンパク質の作用～

探索口腔粘膜的光感受器机制 - 光感受器蛋白的作用 -

• 批准号: 20K18456
• 负责人: 楠元 順哉
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18456/
• 关键词: 光受容; 光受容タンパク質; 口腔粘膜; 口腔内細菌

本研究では、口腔粘膜で光受容タンパク質であるOPN類が発現しているか、またその機能にちなんで光応答しているかを明らかにすることを目的とした。まず、口腔粘膜培養細胞ならびに患者から得られた手術検体を用いて、OPN類の遺伝子発現の有無をシーケンス解析で確認した。その結果、少なくともOPN2,3,4は口腔粘膜に発現していることが明らかにできた。次に、口腔粘膜培養細胞におけるOPN類の発現量の違いを、細胞種ごとにリアルタイムPCRで定量解析したところ、現時点ではOPN3の発現量が最も多く、また細胞種によって異なることを明らかにした。これには、皮膚と共通の構成細胞（keartinocyte、fibroblast）とも比較を行っている。一方、組織においても定量解析を行い、OPN3が最も多く、OPN4もほぼ同等に高い発現量を示した。口腔粘膜と顎下腺とでは、各OPN類の発現量は組織間で差異があった。以上、口腔粘膜でのOPN類の発現については確認することができた。引き続き、精度を上げて実験を行っていく。さらに、顎下腺からprimary cultureを行い、唾液腺細胞のvitro実験も開始することができた。機能面については、歯肉線維芽細胞でOPN3のknockdownを行ったところ、knockdown効率は安定して90%以上であった。これにより、現在青色光を照射した際に、aSMAの発現量にどのような影響があるか、検討中である。また、光照射によるシグナル伝達の解析も進めている。

The purpose of this study is to investigate the effects of OPN on the oral mucosa. The presence or absence of OPN gene expression in cultured cells of oral mucosa and patients was confirmed by analysis of the presence or absence of OPN gene expression. OPN2,3,4 and OPN2,3,4 are the results of oral mucosa development. In addition, the expression of OPN in cultured cells of oral mucosa was analyzed quantitatively by PCR. At present, the expression of OPN3 in cultured cells was the most abundant. The skin and the common constituent cells (keartinocyte, fibroblast) are compared. A party, organization, quantitative analysis, OPN3, OPN4, etc. Oral mucosa, submandibular glands, and the amount of OPN present in different tissues vary. The occurrence of OPN in oral mucosa is confirmed. For example, if you want to improve your accuracy, you can do so in the future. The submandibular gland is in the process of primary culture, and the salivary gland cells are in the process of vitro culture. Function: The knockdown rate of OPN3 is more than 90%. When the blue light is irradiated, the amount of SMA is affected. The analysis method of light irradiation and light irradiation