歯周病菌のIX型分泌機構関連遺伝子を持つオペロンの役割と病原性への関与

点击翻译按钮获取中文摘要

口腔内細菌Porphyromonas gingivalisは主要な病原因子であるジンジパインをIX型分泌装置から分泌する。しかし，IX型分泌機構の構成タンパク質や分泌機構の詳細については未だ解明されていないところがある。P. gingivalis ATCC33277株のゲノム上に存在する，PGN_0297からPGN_0301までの遺伝子によって構成されるPGN_0296オペロンに着目し，研究を行ってきた。以前に，このオペロン中のPGN_0300遺伝子の遺伝子産物はIX型分泌装置が正常に働くために必要で，ジンジパインが正常に分泌されて機能するためにも必要であること，またPGN_0297遺伝子もジンジパインが正常に働くために必要であることを報告した。 今年度は，このオペロンに含まれるPGN_0298遺伝子とPGN_0301遺伝子の検討を行った。まず，P. gingivalis ATCC33277株を親株として，ゲノム上に存在するPGN_0296遺伝子とPGN_0298遺伝子のそれぞれを相同組換えにより破壊することを試み，PGN_0298遺伝子とPGN_0301遺伝子の検討を行った。その結果，PGN_0298遺伝子の欠損株の作成効率が極めて低かった。そのため，PGN_0298遺伝子導入プラスミドを使用し検討した結果，PGN_0298遺伝子が必須遺伝子あることが示唆された。また，PGN_0298遺伝子欠損株のコロニーが白色のコロニーを形成したことからジンジパインの分泌に影響する遺伝子である遺伝子であることも示唆された。また，PGN_0301遺伝子産物を構造から解析するため，大腸菌を用いて作製した組換えタンパク質を結晶化した。