脂質メディエーターの上皮細胞多層化制御による歯周炎発症抑制と歯根嚢胞治療法の開発

通过脂质介质控制上皮细胞多层化来抑制牙周炎的发生和根囊肿治疗方法的发展

• 批准号: 20K18550
• 负责人: 山本 美咲
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Fukuoka Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18550/
• 关键词: タイト結合; 三次元培養; 非角化重層扁平上皮; スフィンゴシン-1-リン酸(S1P); K38; S1P; 上皮細胞多層化制御; 歯周炎; 歯根嚢胞

本研究は、タイト結合形成の分子機構に着目しながら、細胞の増殖・遊走・分化等多彩な作用をもつ脂質メディエーターであるS1P（スフィンゴシン-1-リン酸）を介した上皮のタイト結合形成と多層化制御に関わるシグナリング経路の解明と上皮細胞制御による歯周炎の発症抑制・歯根嚢胞の新規治療法の開発を目的とするものである。in vitro実験系として、非角化重層扁平上皮様構造を有するマウスケラチノサイト細胞((K38)を生体内環境に近い三次元培養系で使用することとした。in vivo実験系では、動物モデル作製を含む動物実験計画書の学内承認を得た。in vitro実験系では、セルカルチャーインサートの膜上にK38細胞を播種し、airlift培養による三次元構築を行い、S1P受容体作動薬であるS1PR1作動薬(FTY720) または S1PR2作動薬(CYM-5520)による細胞の重層化（形状）を観察するため、三次元構築と各薬剤の至適濃度を探索した。薬剤は、これまでの細胞実験で報告のある1-2μMとして三次元構築を実施したが、細胞重層過程を再現することができなかった。そこで、二次元（通常培養）での薬剤至適濃度探索に切り替えた。S1P受容体作動薬添加による細胞死は生じなかったため、薬剤添加に起因するものではなく、使用した細胞の状態に起因したものと考えた。

这项研究侧重于紧密键形成的分子机制，旨在阐明通过S1P（鞘氨醇1-磷酸盐）调节上皮上皮紧密键形成和多层次的信号传导途径，该脂质介质是一种具有多种影响的脂质介体，例如细胞增殖，移植和差异，以及开发的效果，以及开发的开发。牙周炎通过上皮细胞控制。作为一种体外实验系统，在三维培养系统中使用了小鼠角质形成细胞（（K38），具有非掌毒分层的鳞状结构，该结构与体内环境接近的三维培养系统中。在体内实验系统中，动物实验设计，包括动物模型在内的动物实验模型，在k38培养物中，均受元素的培养。使用空运培养物进行三维结构，S1PR1激动剂（FTY720），一种S1P受体激动剂，或者通过S1PR2激动剂（CYM-5520）观察细胞的细胞分层（形状），我们研究了每种药物的最佳浓度，但该药物均已构建为1-2-2-2。因此，我们在二维中搜索药物的最佳浓度（正常培养物）。