Development of treatment for aspiration pneumonia using exosomes secreted by stem cells

利用干细胞分泌的外泌体开发吸入性肺炎的治疗方法

• 批准号: 20K18558
• 负责人: 椙村 有紀子
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18558/
• 关键词: 歯髄幹細胞; 培養上清; パラクライン効果; エクソソーム; マクロファージ; 嚥下障害モデル; 誤嚥性肺炎; 再生医療; 抗炎症; 嚥下障害; 血管新生; 乳歯歯髄幹細胞; 幹細胞

加齢とともに肺炎による死亡率は増加し，諸家の報告により異なるが，高齢者の肺炎の70%以上が誤嚥性肺炎であるといわれている．誤嚥性肺炎に対し口腔ケア，嚥下訓練による予防が行われているが，根本的な治療法はなく，新しい治療法の開発が求められている．前年度までは，In vitroの実験を中心に進めエクソソームには抗炎症効果，末梢神経再生効果を有することがわかった．今年度は，In vivoの実験を中心に進めた．エクソソームは，歯髄幹細胞培養上清より超遠心法のペレットダウン法を用いて分離した．分離した試料がエクソソームであることを確認するために動的光散乱法，電子顕微鏡，ウェスタンブロット法をした．本研究では，ラットの上喉頭神経を圧挫した嚥下障害モデルを用いて，エクソソームによる治療効果の可能性を検討した．まずは，嚥下障害モデルラットに対するエクソソームの投与方法について検討し，今回は尾静脈より単回投与することを選択した．実験群は．偽手術群，損傷群，エクソソーム投与の3群を設定した．それぞれの群のラットの体重の変化，嚥下回数，摂水量を測定し比較した．損傷した上喉頭神経の電気生理学的評価や遺伝子学的変化をリアルタイムPCR法にて定量化した．また，トルイジンブルー染色や透過型顕微鏡を用いて神経軸索を形態学的に評価した．肺の炎症変化は，H-E染色，リアルタイムPCR法にて評価した．末梢血を採取し，白血球数やC反応性タンパク（CRP）にて炎症の程度を評価，サブスタンスPにて嚥下障害の程度を評価した．これらの結果をまとめ，今後は治療効果のメカニズムについて検討していく予定である．

Add 齢 と と も に pneumonia に よ る mortality は raised し, all の report に よ り different な る が, high 齢 の pneumonia の 70% above が aspiration pneumonia で あ る と い わ れ て い る. Aspiration pneumonia に し seaborne oral ケ ア, swallowing training に よ る line to prevent が わ れ て い る が, fundamental な therapy は な く, new し い therapy の open 発 が o め ら れ て い る. Before the annual ま で は, the In vitro の be 験 を center に into め エ ク ソ ソ ー ム に は anti-inflammatory unseen fruit, peripheral god 経 regeneration unseen fruit を す る こ と が わ か っ た. This year めた, In vivo <s:1> laboratory を center に enter めた. エ ク ソ ソ ー ム は, 歯 marrow stem cell culture supernatant よ り buzzer-beaters art の ペ レ ッ ト ダ ウ を ン method with い て separation し た. Separation し た sample が エ ク ソ ソ ー ム で あ る こ と を confirm す る た め に light scattered method, electronic 顕 micromirror, ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト method を し た. This study で は, ラ ッ ト の larynx god 経 を 圧 fell し た swallow handicap of モ デ ル を with い て, エ ク ソ ソ ー ム に よ る treatment services fruit の possibility を beg し 検 た. ま ず は, swallow handicap of モ デ ル ラ ッ ト に す seaborne る エ ク ソ ソ ー ム の cast and methods に つ い て 検 for し, today back to は caudal vein よ り 単 cast back and す る こ と を sentaku し た. Experimental group youdaoplaceholder7. The pseudo-surgery group, injury group, エ ソソ ソソ ム ム ム and <s:1> 3 groups を set <s:1> た. Youdaoplaceholder0 group <s:1> ラット weight <e:1> change, number of swallowing times, 摂 water volume を measurement <s:1> comparison た. Injury: た upper larynx, theoshin, immunophysiology, 価や, 伝, changes in biology, をリア, タ, ム, PCR, にて, quantification, た. ま た, ト ル イ ジ ン ブ ル ー dyeing や type through 顕 micromirror を with い て god 経 axon を morphology に review 価 し た. Lung inflammation transformation, H-E staining, リア タ タ ム ム ムPCR method にて evaluation 価 た た た. Peripheral blood を し, white blood cell count や C anti 応 sex タ ン パ ク (CRP) に て degree of inflammation の を review 価, サ ブ ス タ ン ス P に て swallow handicap of を の degree evaluation 価 し た. The results of <s:1> れら をまとめ and the therapeutic effect of <s:1> treatment in the future メカニズムに メカニズムに て検 て検 て検 て検 to determine である て く く く.

项目成果

Exosomes derived from mesenchymal stem cells stimulated by hypoxia accelerated osteogenesis

缺氧刺激的间充质干细胞来源的外泌体加速成骨

• 发表时间: 2021
• 作者: Kohei SAKAGUCHI;Kiyoshi SAKAI;Yukiko SUGIMURA-WAKAYAMA; Yoshiro KOMA;Junna WATANABE;Hiroshi MARUYAMA;Liu;Kehong;Dong Jiao;Hideharu HIBI
• 通讯作者: Hideharu HIBI

Peripheral Nerve in a Novel Rat Model of

新型大鼠模型中的周围神经

• DOI: 10.1007/978-1-0716-0655-1_9
• 发表时间: 2020
• 期刊: Methods Mol Biol
• 作者: Sakai Kiyoshi;Tsuruta Takeshi;Watanabe Junna;Sugimura Yukiko;Sakaguchi Kohei;Katagiri Wataru;Hibi Hideharu
• 通讯作者: Hibi Hideharu

骨造成後の骨補填材に感染が波及した1例

植骨术后感染扩散至植骨材料一例

• 发表时间: 2020
• 作者: Ashida Maki;Tsutsumi Yusuke;Homma Kou;Chen Peng;Shimojo Masayuki;Hanawa Takao;岡部一登，藤尾正人，酒井陽，椙村有紀子，坂口晃平，渡邊純奈，日比英晴;鈴木絢子;渡邊純奈，岡部一登，酒井陽，藤尾正人，椙村有紀子，坂口晃平，佐世曉，日比英晴
• 通讯作者: 渡邊純奈，岡部一登，酒井陽，藤尾正人，椙村有紀子，坂口晃平，佐世曉，日比英晴

骨髄間葉系幹細胞が分泌する細胞外小胞による歯周組織再生

利用骨髓间充质干细胞分泌的细胞外囊泡进行牙周组织再生

• 发表时间: 2022
• 作者: Dong J;Sakai K;Koma Y;Watanabe J;Liu K;Maruyama H;Sakaguchi K;Hibi H;坂口晃平，酒井陽，椙村有紀子，小間義朗，渡邊純奈，丸山紗季，丸山裕，日比英晴
• 通讯作者: 坂口晃平，酒井陽，椙村有紀子，小間義朗，渡邊純奈，丸山紗季，丸山裕，日比英晴

シェーグレン症候群の唾液腺細胞老化に幹細胞由来細胞外小胞が与える影響

干细胞来源的细胞外囊泡对干燥综合征唾液腺细胞衰老的影响

• 发表时间: 2021
• 作者: 門田千穂;小川卓也;姜順花;東堀紀尚;依田哲也;森山啓司.;宋昕蔓，岡部一登，神尾尚伸，太田優也，小原豪，外山直人，日比英晴;小間義朗，酒井陽，渡邊純奈，椙村有紀子，坂口晃平，丸山裕，日比英晴
• 通讯作者: 小間義朗，酒井陽，渡邊純奈，椙村有紀子，坂口晃平，丸山裕，日比英晴