毛髪ケラチンのトリプシン消化物質量分析による毛髪鑑別法の開発

基于毛发角蛋白胰蛋白酶消化物质量分析的毛发鉴定方法的开发

• 批准号: 20K21713
• 负责人: 田中 経彦
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-07-30 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K21713/
• 关键词: 毛髪ケラチン; アミノ酸多型; 質量分析計; 個人識別; 質量分析; 毛髪; ケラチン; 変異

毛根以外の毛幹部のケラチンをトリプシン消化して得たペプチドの質量分析で検出した多型により、毛髪の異同を解析できることが確認された。日本人1家族（両親とその子1名）、その家族と非血縁者2名の毛髪1㎝（毛幹部）をトリプシン消化して得たケラチン由来のペプチドから、液体クロマトグラフィ質量分析により、17種ある毛髪ケラチンの類似配列を考慮しつつ8種のケラチンから40種程度のアミノ酸変異候補を検出した。検証のためケラチン各部位のDNA塩基配列を解析した。ケラチンK33Bの多型A215PヘテロがDNA解析でも検出された。この多型は、質量分析では、家族（両親、子供1名）では全員ヘテロで検出されたが、非血縁者2名ではAのみであった。公開データベースEnsemblによれば、このAlleleは、中国タイ族，華北人，ベトナム人が2％，華南人が3％，日本人（106人）では16％に上る。他方アフリカ、非フィン人系ヨーロッパ、中南米（インディオ）、ユダヤ系には存在しない。この多型は欧米の先行研究でも報告されていない。Ensemblにデータを公開していない韓国については不明である。他に質量分析で検出された５多型部位を含む4ペプチドに対応するDNAで、日本人106人データを分類すると、標準配列どおり（46％）を含め13グループとなった。ゲノムDNAや血液型を利用できない状況の代替法として、個人識別は無理にしても毛髪の異同を識別するのに有用性があると言える。DNAケラチンのアミノ酸配列は、血漿たんぱく質や精漿たんぱく質と相同性がなく、これらがコンタミしても質量分析できる。他の多型候補は、DNA変異に基づかず、アーチファクト生成（カルバミル化によるアミノ基修飾、閉環反応、脱アミド反応）と考えられた。アーチファクトの生成を抑制する検討実験は、質量分析計トラブルでできなかった。

The quality analysis of hair stem other than hair root shows that the hair stem is different from hair root. Japanese 1 family (1 child), 2 families (1 child), 2 families (1 child), 2 children (1 child), 3 children (1 child), 4 children (1 child), 4 children (1 child), 3 children (1 child), 4 children (1 Analysis of DNA base alignment in various parts of the genome The polymorphism of K33B A215P was detected by DNA analysis. The polytype, quality analysis, family (1 parent, 1 child), all members, 2 non-blood donors, A and B Open to all, China, North China, South China, Japan (106), 16%. The other side is very popular, and the other side is very popular, and the other side is very popular. A preliminary study of this polytype is reported. Ensembl is open to the public. In addition, the quality analysis showed that 5 polymorphic sites were identified, including 4 polymorphic sites, 106 Japanese polymorphic sites, and 13 polymorphic sites. The use of DNA and blood types in the identification of individuals and their usefulness in identifying similarities and differences DNA sequencing, plasma quality, semen quality, identity, quality analysis The polytype candidate, DNA variant base modification, deletion, and deletion are examined. The quality of the product is determined by the quality analysis method.