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Practical application of exposure dose evaluation method by DNA damage analysis for radiation exposure accidents

DNA损伤分析照射剂量评估方法在辐射事故中的实际应用

基本信息

批准号：
21H01861
负责人：
清水喜久雄
金额：
$ 11.48万
依托单位：
University of Fukui
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究はポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を用いて、放射線によるDNA損傷を指標として、緊急被ばく時の吸収線量の評価を行うものである。2022年度は、項目②実際の現場環境で求められる低線量放射線での評価が可能な方法の検討(感度の向上)として、(i)複数のプライマーを用いることで、PCRによって増幅するDNA領域を拡大することにより感度を向上させる方法について検討を進めた。ガンマ線および陽子線を照射した場合について、複数のプライマーを用いた場合について、感度の向上が確認できた。この成果は原著論文として発表準備中である。また、(ii)PCRに用いるDNA合成酵素(ポリメラーゼ)が異なるものを用いることで、DNA損傷の程度および質を評価し、感度の向上につなげることを検討した。塩基の一種であるG(グアニン)の酸化体である8-OHGを、1本鎖切断に変換する酵素処理を行った結果、PCRを阻害するDNA損傷量が増加した結果が得られた。この結果は、塩基の酸化がPCRを阻害することを示唆するものである。酵素反応を用いて放射線照射によるDNA損傷を鎖切断に変換することでの検出感度の向上の可能性が示された。項目③放射線取扱施設での実証実験をもとにした課題の抽出と解決として、(i)小型・可搬型の装置で解析について、小型可搬型のPCR装置(PicoGene PCR1100)を用いた試験を行った。また、 (ii)評価結果が得られるまでに1時間以内とする目標を設定し、この解決のための検討を行った。具体的には、PCRに用いる酵素を変更し(Fast SYBR、Appiled Biosystems社製)し、従来は2時間40分ほど必要であったPCRの時間を、50分程度に短縮し、同等の結果を得られることを確認した。

The purpose of this study is to determine the effect of radiation exposure on DNA response (PCR). In this study, you need to know that you are in a bad situation. In 2022, project 2 international environmental requirements for low-dose radiation lines may be affected by the method (sensitivity up). (I) the complex data is used in the field of DNA. In the field of DNA, the sensitivity of the DNA field is improved. This is the first time that the number of copies is closed, the number of copies is closed, the sensitivity is up, and the sensitivity is up. In the preparation of the original work of "achievements", the table of articles is in preparation. Ii, (ii) PCR were used to measure the activity of DNA biosynthetic enzyme (enzyme). The sensitivity of the enzyme was higher than that of the control. Based on the results of an acidified enzyme 8-OHG, one enzyme cut-off enzyme assay, and a PCR block DNA assay, the results showed good results. The results show that the acidification of PCR does not affect the performance of the system. Enzyme reverse radiation is used to irradiate DNA rays to cut off the sensitivity. The possibility of upward sensitivity indicates sensitivity. Item 3 is used to extract the solution of the problem, (I) the small removable device, the small removable PCR device (PicoGene PCR1100), and the small removable device. Monitoring, (ii) results show that you can change the settings of the target within the first time, and then you will be able to improve the performance of your computer. It is necessary to check the PCR time in 40 minutes after 2 minutes, 50 points short time, and the same results with the same results. For specific samples and PCR users, it is necessary to check the PCR time at 40 minutes after 2 minutes, and the same results are obtained.