白血病単一細胞分岐鎖アミノ酸代謝特性解析のためのマイクロ分離分析法の開発
白血病单细胞支链氨基酸代谢表征微分离分析方法的开发
基本信息
- 批准号:21H02613
- 负责人:
- 金额:$ 11.07万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
研究代表者らはこれまでに、分岐鎖アミノ酸の代謝変化が白血病の悪性化に直接寄与していることを明らかにした。白血病悪性化における分岐鎖アミノ酸代謝の全体像を明らかにするためには、単一細胞レベルでの解析が必須である。そこで、本研究において、白血病単一細胞アミノ酸定量のためのマイクロ分離分析法開発を目的とする。オンチップ液体クロマトグラフィーによる高性能分離と蛍光顕微鏡による高感度検出を組み合わせ、単一細胞アミノ酸の高精度定量を可能にする。単一細胞アミノ酸定量のためのマイクロ分離分析法開発に向けて、本年度は、以下の2つの要素技術について検討した。(1)単一細胞分析において、前処理操作における細胞内アミノ酸の希釈が課題である。そこで、通常の前処理操作により希釈された試料を大量にオンチップ液体クロマトグラフィーに注入できる濃縮方法について検討した。アミノ酸をオンチップ液体クロマトグラフィーに注入する際の溶媒として種々の溶液(緩衝液、酸、有機溶媒)について調べた。数種の溶液を用いた際、オンチップ液体クロマトグラフィー注入時の濃縮が観察された。(2)オンチップ液体クロマトグラフィー技術は現状、保持が弱く、分析対象化合物が限定されている。アミノ酸の分離分析においては、疎水性の高いアミノ酸しか保持させることができない。そこで、多孔性構造の作製条件の検討を行った。微細加工技術における条件が定まり、多孔性構造を有する液体クロマトグラフィーチップの作製が可能となった。
The study's representatives expressed their concern about the metabolic changes in leukemia, which were directly related to leukemia. The analysis of the entire spectrum of acid metabolism in leukemia differentiation is essential. The aim of this study is to develop a method for the quantitative analysis of leukemic cells. High performance separation, high sensitivity detection, and high accuracy quantification of acid in single cells are possible in the development of liquid chromatography and optical microscopy. This year, the following two key technologies were developed for quantitative analysis of single cell acids. (1) There are many problems related to intracellular amino acids in single cell analysis and pretreatment operations. In general, the pre-treatment operation requires a large amount of liquid to be injected and concentrated. The solvent and seed solution (buffer solution, acid, organic solvent) are used to adjust the solvent during injection. Several kinds of solutions are used in the middle of the solution, and the concentration is observed when the solution is injected. (2) Liquid quality control technology is not current, weak, analytical target compounds are limited. The separation analysis of the acid is carried out in the presence of water and the acid is maintained in the presence of water. A study on the working conditions of porous structures was carried out. The conditions for micromachining technology are fixed, and porous structures are available.
项目成果
期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Fast analysis using pillar array columns: Quantification of branched-chain α-keto acids in human plasma samples
- DOI:10.1016/j.jpba.2021.114019
- 发表时间:2021-03-13
- 期刊:
- 影响因子:3.4
- 作者:Fujiwara, Takuya;Funatsu, Takashi;Tsunoda, Makoto
- 通讯作者:Tsunoda, Makoto
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